Đồ án tốt nghiệp
MỞ ĐẦU
Công nghiệp chế biến thủy sản đang ngày càng phát triển trên quy mô toàn cầu.
rất nhiều nước ở Đông Nam Á và Nam Mĩ đang đẩy mạnh ngành công nghiệp này chủ
yếu cho xuất khẩu như Ấn Độ, Indonexia, Thái Lan, Việt Nam…quá trình này bao gồm
cả nuôi trồng và đánh bắt ở biển, với một sản lượng đông lạnh rất lớn. như vậy tất yếu
một lượng phế thải không nhỏ bị vứt bỏ, để thối rữa và do đó gây ô nhiễm môi trường.
Theo ước tính lượng phế thải tôm, cua…hàng năm là 1,44 triệu tấn (trọng lượng khô).
Tuy vậy chính lượng phế thải vỏ tôm, cua, mực…này lại là một nguồn tiềm ẩn to lớn
về protein, chất màu và chitin – polysaccarit.
Chitin là một polyme thiên nhiên có cấu tạo mạch thẳng gồm các đơn vị Naxetyl-Dglucosamin nối với nhau bằng liên kết
(1,4)- glucosit hiện đang được ứng
dụng nhiều trong y học, dược phẩm, công nghiệp thực phẩm, xử lý nước. Sức ép về
kinh tế và môi trường ngày càng tăng của ngành chế biến thủy sản buộc phải sớm lựa
chọn những biện pháp xử lý thích hợp nhằm phối hợp giải quyết vấn đề môi trường và
thu hồi chitin. Cho đến nay việc thu hồi chitin từ những phế thải thủy sản đã cho những
kết quả có triển vọng về kinh tế cũng như bảo vệ môi trường.
Hiện nay đang có hai phương pháp chủ yếu hay dùng để tách chitin: phương
pháp truyền thống (phương pháp hóa học) và phương pháp sinh học (dung enzym hoặc
vi khuẩn). Tuy nhiên, Việc sản xuất chitin và dẫn xuất của chúng là những quá trình
hóa học đã và đang là mối quan tâm lớn hiện nay. Chitn thu được phụ thuộc nhiều vào
quy trình xử lý với axit và kiềm nóng để khử khoáng và khử protein. Quá trình này tiêu
tốn năng lượng, sản ra một thể tích lớn nước thải chứa nhiều NaOH, HCl, gây ăn mòn
và ô nhiễm mạnh, đông thời rất khó tách các sản phẩm còn có giá trị như chất màu,
protein. Nhưng điều quan trọng hơn cả là tính không ổn định của quá trình làm ảnh
hưởng đến chất lượng của chitin. Những bất lợi của phương pháp hóa học này nếu xét
theo các yếu tố về môi trường, kinh tế và chất lượng sản phẩm có thể thấy:
Về môi trường: quá trình hóa học có thể là được xem như là không hợp lý vì:
Cần sử dụng một dung lượng lớn axit, kiềm, nước rửa.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
1
Đồ án tốt nghiệp
Nước thải là một chất ăn mòn và chứa những chất gây ô nhiễm như:
protein, khoáng đã hòa tan.
Về kinh tế: quá trình hóa học trở nên kém hiệu quả hơn vì 4 lý do:
Chi phí cho các yếu tố môi trường (như đã nêu trên)
Chi phí năng lượng khi xử lý kiềm để loại protein, và tiếp tục chuyển
chitin thành chitosan.
Tiêu tốn một lượng lớn nước để rửa kiềm.
Không thu hồi được các sản phẩm còn có giá trị khác
Về chất lượng sản phẩm: chất lượng giảm vì 2 lý do:
Việc sử dụng axit và kiềm nóng dẫn đến việc cắt mạch của chitin làm cho
sản phẩm thay đổi trọng lượng phân tử và độ nhớt (tức là chitin không
giữ được tính chất nguyên bản củ mình).
Việc đề acetyl hóa một cách ngẫu nhiên bằng axit và đặc biệt là kiềm
nóng đã tạo ra nhiều sản phẩm khác nhau(có DA khác nhau) và còn tiếp
tục gây biến tính những sản phẩm này thành chitosan và các dạng sản
phẩm khác
Những lý do dó đã làm cho chitin và những dẫn xuất của nó chưa được thương
mại hóa trong các lĩnh vực và ứng dụng.
Để khắc phục các vấn đề trên, em đã lựa chọn hướng tách chiết chitin theo
phương pháp sinh học. Ưu điểm của phương pháp này được thể hiện ở 3 khía
cạnh:
Về môi trường: ít gây ô nhiễm môi trường, lượng nước rửa ít hơn.
Về kinh tế: giảm thiểu chi phí cho năng lượng, đồng thời có thêm các sản phẩm
kèm theo (chất màu và protein cho thức ăn gia súc) do đó giá thành rẻ hơn.
Về chất lượng sản phẩm: chitin thu được có trọng lượng phân tử và độ nhớt
không bị thay đổi nhiều do điều kiện xử lý êm dịu hơn.
Đây là một giải pháp cập nhật, giải quyết được những nhược điểm của phương
pháp truyền thống. hiện nay lĩnh vực nghiên cứu sinh thái chitin đã trở thành một
ngành khoa học thực thụ, đã có nhiều hội nghị thế giới về “chitin enzymology” và
những hoạt động này rất phù hợp với việc bảo vệ môi trường nhất là trong lĩnh vực hóa
học xanh.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
2
Đồ án tốt nghiệp
CHƯƠNG I: TỔNG QUAN
I.1: Phế thải trong công nghiệp chế biến
Tôm là nguồn thủy sản dồi dào và có giá trị kinh tế cao nhưng việc khai thác,
đánh bắt phụ thuộc rất lớn vào điều kiện tự nhiên và mang tính mùa vụ vì vậy ngoài
đánh bắt tự nhiên người ta còn đẩy mạnh theo hướng nuôi trồng đảm bảo cung cấp
nguyên liệu một cách thường xuyên cho các nhà máy chế biến thủy sản xuất khẩu.
Giáp xác là nguồn nguyên liệu thủy sản dồi dào chiếm từ 30 – 35% tổng sản
lượng nguyên liệu ở Việt Nam. Trong công nghiệp chế biến thủy sản xuất khẩu, tỷ lệ
cơ cấu các mặt hàng đông lạnh giáp xác chiếm từ 70 – 80% công suất chế biến. Hàng
năm các nhà máy chế biến đã thải ra một lượng phế liệu giáp xác khá lớn khoảng 70
000 tấn. Riêng ở tỉnh Khánh Hòa lượng phế liệu này vào khoảng 2257 tấn/năm.
Theo thống kê của tổng cục hải quan, tính đến hết tháng 11/2009, xuất khẩu tôm
của Việt Nam đạt 190 490 tấn, trị giá trên 1,518 tỉ USD, tăng 7,4% vê lượng và 0,73%
về giá trị so với cùng kì năm 2008. Đây là mặt hàng thủy sản duy nhất tăng trưởng
trong năm 2009. Hơn 300 doanh nghiệp tham gia xuất khẩu trong đó 60 doanh nghiệp
dẫn đầu chiếm hơn 80% kim ngạch. 120 doanh nghiệp có giá trị xuất khẩu hơn 1 triệu
USD.
Theo dự báo của ông Trương Đình Hòe, Tổng thư ký Vasep, sang năm 2010,
tôm sú vẫn là sản phẩm xuất khẩu chủ lực trong khi xuât khẩu tôm chân trắng sẽ tăng
gấp đôi lên 500 triệu USD, sản lượng đạt khoảng 150000 tấn. Việt Nam có thể sẽ có lợi
thế ở thị trường tôm chân trắng cỡ nhỏ do có nguồn lao động. Kim ngạch xuất khẩu
tôm sú dự kiến sẽ đạt 1,4 tỷ USD. Theo ông Hòe, sang năm mới, giá thành tôm sú sẽ
tác động trực tiếp lên xuất khẩu chứ không phải là thị trường. Năm 2010, tôm Việt
Nam sẽ là lựa chọn của các nhà nhập khẩu Nhật Bản trong khi Hàn Quốc sau khủng
hoảng sẽ là thị trường quan trọng đôi với Việt Nam (theo Vasep.com.vn).
Việc tiêu thụ một số lượng lớn tôm nguyên liệu của các nhà máy chế biến thủy
sản đã thải ra một lượng lớn phế liệu trong đó phế liệu vỏ, đầu tôm là chủ yếu. Các loại
phế liệu này nếu thải trực tiếp ra môi trường sẽ gây ô nhiễm môi trường trầm trọng và
nếu đem xử lý chất thải thì chi phí sẽ rất lớn.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
3
Đồ án tốt nghiệp
Ngày nay đã có rất nhiều hướng nghiên cứu sử dụng phế liệu tôm để sản xuất
các chế phẩm có giá trị trong đó quan trọng nhất là việc sản xuất chitin – chitosan từ vỏ
giáp xác.
I.2: Thành phần phế phẩm tôm:
Tôm là đối tượng quan trọng của ngành nuôi trồng và chế biến thủy sản Việt
Nam. Hiện nay ở nước ta, kĩ thuật khai thác và nuôi tôm rất phát triển và ngày càng
cung cấp nhiều nguyên liệu cho các nhà máy chế biến thủy sản trong nước và xuất
khẩu nhiều mặt hang như:
Tôm tươi còn vỏ, đầu (nguyên con) cấp đông IQF hoặc Block.
Tôm vỏ bỏ đầu cấp đông IQF hoặc Block.
Tôm bóc vỏ, bỏ chỉ lưng cấp đông IQF.
Tôm bóc vỏ, còn đốt đuôi cấp đông IQF.
Tôm dạng sản phẩm định hình, làm chín.
Tôm bóc vỏ, đóng hộp.
Điều này chứng tỏ tôm là một mặt hang đem lại nguồn lợi kinh tế lớn cho đất
nước nhưng đồng thời cũng thải ra một lượng lớn đáng kể phế liệu, chủ yếu là vỏ và
đầu tôm. Ngoài ra, có một lượng lớn đáng kể thịt vụn do bóc nõn không cẩn thận hoặc
một số tôm bị thải loại do biến màu, chất lượng không đảm bảo.
Tùy theo giống, loài và phương pháp gia công chế biến mà lượng phế liệu này có thể
thay đổi từ 40% (đối với tôm sú) đến 60% (đối với tôm càng xanh) lượng nguyên liệu
thu mua. Đối với sản phẩm tôm bóc nõn và rút ruột thì mất mát theo vỏ tôm và đuôi
khoảng 25%. Nhìn chung, trong phế liệu tôm thì trọng lượng phần đầu thường gấp 3 –
4 lần so với phần vỏ và đuôi.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
4
Đồ án tốt nghiệp
Theo giáo trình “Sản xuất các chế phẩm kỹ thuật và y dược từ phế liệu thuỷ
sản”[11] của trường Đại học Nha Trang ta có các bảng sau:
Bảng 1.1: Thành phần và trọng lượng của tôm (%)
I.3 Cấu tạo và thành phần hóa học của phế liệu tôm
I.3.1: cấu tạo vỏ tôm:
Vỏ tôm chia làm 4 lớp chính:
-
Lớp biểu bì (epicucle).
Lớp màu.
Lớp canxi hóa.
Lớp không bị canxi hóa.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
5
Đồ án tốt nghiệp
Lớp biểu bì, lớp màu, lớp canxi hóa cứng do sự lắng đọng của canxi. Lớp màu,
lớp canxi hóa, lớp không bị canxi hóa chứa nhiều chitin nhưng lớp biểu bì thì không.
Ta gọi các lớp có chứa chitin là endocuicle.
Lớp màu: tính chất của lớp này do sự có mặt của những thể hình hạt của vật
chất mang màu giống dạng melanin. Chúng gồm những túi khứ hoặc những không bào.
Một vài vùng xuất hiện những hệ thống rãnh thẳng đứng có phân nhánh, là con đường
cho canxi thẩm thấu vào.
Lớp biểu bì (epcuticle): những nghiên cứu cho thấy lớp màng nhanh chóng bị
biến đỏ bởi Fucxin, có điểm pH = 5,1 không chứa chitin. Nó khác với các vỏ còn lại,
bắt màu với anilin xanh. Lớp epicuticle có lipit vì thế nó cản trở tác động của axit ở
nhiệt độ thường trong công đoạn khử khoáng bằng axit hơn là các lớp bên trong. Màu
của lớp này thường vàng rất nhạt có chứa polyphenoloxidase và bị hóa cứng bởi
puinone – tannin. Lớp epicuticle liên kết với một số màng mỏng bên ngoài cản trở hòa
tan ngay cả trong môi trường axit đậm đặc do nó có chứa các mắt xích paratin mạch
thẳng.
Lớp canxi hóa: lớp này chiếm phần lớn vỏ, thường có màu xanh trải đều khắp,
chitin ở trạng thái tạo phức với canxi.
Lớp không bị canxi hóa: vùng trong cùng của lớp vỏ được tạo thành bởi một
phần tương đối nhỏ so với tổng chiều dày bao gồm các phức chitin – protein bền vững
không có canxi và quinine.
I.3.2: Thành phần hóa học của vỏ tôm:
Protein: thành phần protein trong phế liệu tôm thường tôn tại ở 2 dạng: dạng tự
do và dạng liên kết
Dạng tự do: dạng này là tồn tại ở phần thịt tôm từ một số tôm bị biến đổi và vứt
đi lẫn vào phế liệu hoặc phần đầu và thịt còn sót lại trong đầu và nội tạng của tôm. Nếu
công nhân vặt đầu không đúng kĩ thuật thì phần protein bị tổn thất vào phế liệu nhiều
làm tăng tiêu hao nguyên vật liệu, mặt khác phế liệu này khó xử lý hơn.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
6
Đồ án tốt nghiệp
Dạng phức tạp: ở dạng này protein không hòa tan và thường liên kết với chitin,
canxicacbonat, với lipit tạo thành lipoprotein, với sắc tố tạo proteincarotenoit…như
một phần thống nhất quyết định tính bền vững của vỏ tôm.
-
-
-
Chitin: tồn tại dưới dạng liên kết bởi những liên kết đồng hóa trị với các protein
dưới dạng phức hợp chitin – protein, liên kết với các hợp chất khoáng và các
hợp chất hữu cơ khác gây khó khăn cho việc tách và chiết chúng.
Canxi: trong vỏ, đầu tôm, vỏ ghẹ…có chứa một lượng lớn muối vô cơ, chủ yếu
là muối CaCO3, hàm lượng Ca3(PO4)2 mặc dù không nhiều nhưng trong quá
trình khử khoáng dễ hình thành hợp chất CaHPO 4 không tan trong HCl gây khó
khăn cho quá trình khử khoáng.
Sắc tố: trong vỏ tôm thường có nhiêu loại sắc tố nhưng chủ yếu là astaxanthin.
Enzym: theo tạp chí thủy sản (số 5/1993) hoạt độ enzym proteaza của đầu tôm
khoảng 6,5 đơn vị hoạt độ/gam tươi. Các enzym chủ yếu là enzym của nội tạng
trong đầu tôm và của vi sinh vật thường trú trên tôm nguyên liệu.
Ngoài thành phần chủ yếu kể trên, trong vỏ đầu tôm còn có các thành phần khác
như: nước, lipit, photpho.
Bảng 1.1: Thành phần hóa học của phế liệu tôm
Phế liệu
Đầu tôm
Vỏ tôm
protein
53,10
22,80
chitin
11,10
27,20
lipit
8,90
0,40
tro
22,60
31,70
canxi
7,20
11,10
photpho
1,68
3,16
Như vậy, trong phế liệu tôm hàm lượng chitin chiếm khá cao (từ 11,10 – 27,2%)
và đây là nguồn nguyên liệu lý tưởng để sản xuất chitin.
I.4: Nguồn gốc và sự tồn tại của chitin – chitonsan trong tự
nhiên
Chitin – chitosan là một polysaccarit tôn tại trong tự nhiên với sản lượng rất lớn
(đứng thứ 2 sau xenluloza). Trong tự nhiên chitin tồn tại trong cả động vật và thực vật.
Trong động vật, chitin là một thành phần cấu trúc quan trọng trong vỏ một số động vật
không xương sống như: côn trùng, nhuyễn thể, giáp xác và giun tròn. Trong động vật
bậc cao monomer của chitin là một thành phần chủ yếu trong mô da, nó giúp cho sự tái
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
7
Đồ án tốt nghiệp
tạo và gắn liền các vết thương ở da. Trong thực vật chitin ở thành tế bào nấm họ
zygenmyctes, các sinh khối nấm mốc, một số loại tảo[1].
Chitin - chitosan là polysacharit có đạm không độc, có khối lượng phân tử lớn.
Cấu trúc của chitin là tập hợp các monosacharit (N-acetyl-β-D-glucosamine) liên kết
với nhau bởi các cầu nối glucozit và hình thành một mạng các sợi có tổ chức. Hơn nữa
chitin tồn tại rất hiếm ở trạng thái tự do và hầu như luôn luôn liên kết cộng hóa trị với
các protein, các chất khoáng và các hợp chất hữu khác.
Hình 1: chitin và vỏ tôm
Trong các loài thủy sản, đặc biệt là trong vỏ tôm, cua, ghẹ hàm lượng chitin –
chitosan chiếm khá cao, dao động từ 14 – 35% so với trọng lượng khô [2]. Vì vậy, vỏ
tôm, cua, ghẹ là nguôn nguyên liệu chính để sản xuất chitin – chitosan.
Về mặt lịch sử, chitin được Braconnot phát hiện đầu tiên vào năm 1821, trong
cặn dịch chiết từ một loài nấm. Ông đặt tên cho chất này là “Fungine” để ghi nhớ
nguôn gốc của nó. Năm 1823 Odier phân lập được một chất từ bọ cánh cứng mà ông
gọi là chitin hay “chiton”, tiếng Hy Lạp có nghĩa là vỏ giáp, nhưng ông không phát
hiện ra sự có mặt của Nito trong đó. Cuối cùng cả Odier và Braconnot đều đi đến kết
luận chitin có dạng công thức giống xenlulose.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
8
Đồ án tốt nghiệp
Hình 2: 1) chitin; 2) chitosan; 3) xenlulose
I.5: Cấu trúc hóa học, tính chất hóa lý của chitin
I.5.1: Cấu trúc hóa học của chitin:
Chitin I có cấu trúc tinh thể rất chặt chẽ và đều đặn. Bằng phương pháp nhiễu xạ
tia X, người ta đã chứng minh được chitin tồn tại ở 3 dạng cấu hình: α, β, γ – chitin [3].
Các dạng này của chitin chỉ do sự sắp xếp khác nhau về hướng của mỗi mắt xích
(N – acetyl – D – glucosmin) trong mạch.
Có thể biểu diễn mỗi mắt xích này bằng mũi tên sao cho phần đầu của mũi tên
chỉ nhóm – CH2OH, phần đuôi chỉ nhóm – NHCOCH3, thì các cầu trúc α, β, γ – chitin
được mô tả như sau:
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
9
Đồ án tốt nghiệp
Hình 3: sắp xếp các mạch trong phân tử chitin
α – chitin có cấu trúc các mạch được sắp xếp ngược chiều nhau đều đặn, nên
ngoài liên kết hydro trong một lớp và hệ chuỗi, nó còn có liên kết hydro giữa các lớp
do các chuỗi thuộc lớp kề nhau nên rất bền vững. Do các mắt xích sắp xếp đảo chiều,
xen kẽ thuậ lợi về mặt không gian và năng lượng. Đây cũng là dạng phổ biến trong tự
nhiên.
β, γ – chitin do mắt xích ghép với nhau theo kiểu song song (β – chitin) và hai
song song một ngược chiều (γ – chitin), giữa các lớp không có loại liên kết hydro.
Dạng β – chitin cũng có thể chuyển sang dạng α – chitin nhờ quá trình axetyl hóa cho
cấu trúc tinh thể bền vững hơn.
Qua nhiều nghiên cứu về sự thủy phân chitin bằng enzym hay axit HCl đậm đặc
thì người ta thấy rằng chitin có cấu trúc là một polymer được tạo thành từ các đơn vị N
– acetyl – β – D – glucosamine liên kết với nhau bởi liên kết β – 1,4 – glucozit.
Công thức cấu tạo của chitin:
Tê
n gọi: poly(1,4) – 2 – acetamido – 2 – deoxy – β – D – glucose; poly(1,4) – 2 –
acetamido – 2 – deoxy – β – D – glucopyranose.
Công thức phân tử: [C8H13O5N]n.
Phân tử lượng: Mchitin = (203,09)n.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
10
Đồ án tốt nghiệp
I.5.2: Tính chất hóa lý của chitin [4]
Chitin có màu trắng hay màu trắng phớt hồng, dạng vảy hoặc dạng bột, không
mùi, không vị, không tan trong nước, trong môi trường kiềm, axit loãng và các dung
môi hữu cơ như ete, rượu… nhưng tan trong dung dịch đặc nóng của muối thioxianat
canxi (Ca(SCN)2) tạo thành dung dịch keo, tan được trong hệ dimetylacetamid – LiCl
8% [5], tan trong hexafluoro – isopropyl alcohol (CF 3CHOHCF3) và hexafuoracetone
sesquihydrate (CF3COCF3.H2O) [6]. Chitin có khả năng hấp thu tia hồng ngoại có bước
sóng 884 – 890 cm-1.
Chitin tồn tại với các chất oxy hóa mạnh như thuốc tím (KMnO 4), oxy già
(H2O2), nước javen (NaOCl – NaCl)…, lợi dụng tính chất này mà người ta sử dụng các
chất oxy hóa trên để khử màu cho chitin.
Khi đun nóng trong dung dịch NaOH đậm đặc (40 – 50%), ở nhiệt độ cao thì
chitin sẽ bị mất gốc acetyl tạo thành chitosan:
Lợi dụng tính chất này người ta điều chế ra chitosan – chất có nhiều ứng dụng
như: ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm (màng bao gói, bảo quản thực
phẩm), là chất trung gian điều chế ra glucosamine có nhiều tác dụng trong y
học.
Khi đun nóng trong axit HCl đậm đặc, ở nhiệt độ cao thì chitin sẽ bị cắt mạch
thu được glucosamine:
Lợi dụng tính chất này người ta điều chế ra Glucosamine là một loại thuốc có
tác dụng chống thoái hóa khớp.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
11
Đồ án tốt nghiệp
Phản ứng este hóa :
- Chitin tác dụng với HNO3 đậm đặc cho sản phẩm chitin nitrat.
- Chitin tác dụng với anhydrit sunfuric trong pyridin, dioxan và N,N-dimetylanilin
cho sản phẩm chitin sunfonat.
I.6: Phương pháp thu nhận chitin
I.6.1: Phương pháp hóa học
Chitin có thể được sản xuất theo phương pháp hóa học như sau:
Phế liệu tôm
tươi
Khử protein bằng NaOH 4%, T
= 300 0C , = 24 giờ, w/v = 1/
2,5
Rửa trung tính
Cao hơn 5%
Kiểm tra hàm lượng protein
Khử khoáng bằng HCl 4%, 24
giờ, 3000C
Rửa trung tính
Cao hơn 5%
Kiểm tra hàm lượng protein
chitin
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
12
Đồ án tốt nghiệp
Hiệu quả của quá trình khử protein phụ thuộc vào nhiệt độ, nồng độ và tỉ lệ của
dung dịch với khối lượng vỏ giáp xác. Nồng độ NaOH thường dùng được sử dụng
trong khoảng 1 – 10 % và ở nhiệt độ 50 – 100 0C. Quá trình khử protein thích hợp cũng
có thể đạt được bằng việc xử lý với dung dịch KOH.
Quá trình khử khoáng cũng diễn ra với thời gian dài, nồng độ axit cao, nhiệt độ
cao.
Như vậy phương pháp hóa học có nhiều nhược điểm như gây ô nhiễm môi
trường, ảnh hưởng đến chất lượng chitin, không tận thu được các thành phần có giá trị
khác (chất màu, protein làm thức ăn cho gia súc…) và như thế không giảm được giá
thành sản phẩm, không nâng cao được hiệu quả cho việc sản xuất chitin.
I.6.2: Phương pháp cơ học
Nguyên lý: sử dụng các lực cơ học để tách một phần protein ra khỏi nguyên liệu
vỏ tôm. Quá trình được tiến hành như sau: đầu tôm còn tươi đem rửa sạch, sau đó ép
bằng trục lăn hoặc trục vít, thu protein đem sấy khô và bảo quản. hiệu quả thu hồi
protein của phương pháp này không cao. Tuy nhiên, quá trình này đã loại bỏ được một
phần protein tự do trong đầu tôm vì vậy giảm thiểu được hóa chất sử dụng cho các
công đoạn tiếp theo.
I.6.3: Phương pháp hóa lý
Áp dụng phương pháp này nhằm thu hồi protein từ dịch thủy phân của công
nghệ sản xuất chitin – chitosan theo phương pháp hóa học và phương pháp sinh học.
Nguyên lý dựa trên việc kết tủa protein bằng cách dung axit để điều chỉnh pH dung
dịch chứa protein về điểm đẳng điện của protein, sau đó dùng các phương pháp lắng,
lọc để thu hồi protein.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
13
Đồ án tốt nghiệp
Dịch
protein
Kết tủa protein
Kết tủa protein
Lắng, gạn
Lọc thu protein
Lọc thu protein
Phơi sấy
Bột protein
Phương pháp này có ưu điểm là đơn giản, dễ làm, có thể thu hồi với hiệu suất
cao. Cho phép thu được hầu hết các protein hòa tan do đó có thể ứng dụng để thu hồi
protein trong nước thải của các nhà máy chế biến thực phẩm, chế biến thủy sản.
I.6.4: Phương pháp sinh học
Trong phương pháp sinh học chỉ khác ở công đoạn khử protein và deacetyl
không sử dụng hóa chất mà có thể sử dụng hệ vi khuẩn, nấm men hoặc các enzym để
loại bỏ protein một cách triệt để. Sản phẩm chitosan thu được có chất lượng cao do
không bị ảnh hưởng nhiều bởi hóa chất.
Việc sử dụng phương phap sinh học cũng gặp phải rất nhiều khó khăn như giá
thành sản phẩm có thể cao, tùy thuộc vào loại enzym sử dụng. Việc loại bỏ hoàn toàn
protein có thể đạt được bằng phương pháp hóa học nhưng rất khó đạt được bằng
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
14
Đồ án tốt nghiệp
phương pháp sinh học. Vì vậy, người ta có thể kết hợp hai phương pháp này nhằm khắc
phục những nhược điểm của từng phương pháp. Hiện nay, một trong những khó khăn
trong phương pháp hóa học để sản xuất chitin là thể tích chất thải lớn và trong đó có
chứa các chất ăn mòn, các chất lơ lửng khó xử lý với khối lượng lớn. Những chất này
do công đoạn khử khoáng và khử protein sinh ra. Chính vì vậy, cần thiết phải có các
biện pháp xử lý trước khi thải ra môi trường và điều này làm cho giá thành sản phẩm
tăng lên. Quá trình sản xuất chitin bằng phương pháp hóa học có thể gây nên sự thủy
phân polymer, biến đổi tính chất vật lý và gây ô nhiễm môi trường. Ngược lại, trong
phương pháp sinh học khối lượng chất thải không lớn, protein sau thủy phân có thể thu
hồi làm thức ăn gia súc và bên cạnh đó có thể thu hồi các chất màu. Hơn nữa sẽ hạn
chế được việc xử lý môi trường. Vì vây, muốn sản phẩm chitin có được sự đồng nhất
hơn về các đặc tính lý hóa thì chúng ta phải áp dụng những phương pháp xử lý êm dịu
hơn như viêc sử dụng enzym. Legarraeta và cộng sự (1996) đã sử dụng enzym proteaza
và vi khuẩn có khả năng tạo proteaza để tách protein nhằm thay thế cho phương pháp
hóa học. Hall và De Silva (1994) đã đề xuất phương pháp khử khoáng đơn giản bằng
việc sử dụng lên men lactic như một phương pháp bảo quản phế liệu. Phương pháp này
là dạng ủ chua ban đầu được phát triển cho bảo quản phế liệu tôm pandan trước quá
trình chế biến ở khí hậu nhiệt đới. Ủ chua là một quá trình đơn giản của việc bản quản
nguyên liệu tránh vi sinh vật gây thối và đã được ứng dụng cho bản quản cá trong
nhiều năm (Hall và De Silva, 1994).
Quy trình sản xuất chitin theo phương pháp sinh học của Nguyễn Thị Vân An:
Vỏ tôm
Xay
Khử Protein
Khử khoáng
Sấy khô
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
Chiti
nn
15
Đồ án tốt nghiệp
Nhận xét: chitin thu được có hàm lượng protein và khoáng rất thấp, sản phẩm
chitin có màu sắc đẹp. Điều này có thể giải thích do trong quá trình khử protein bằng
nước ép vỏ dứa thì đồng thời xảy ra quá trình khử khoáng nên liên kết giữa các muối
Canxi và chitin bị cắt đứt càng tạo điều kiện cho quá trình khử khoáng và khử protein
diễn ra một cách triệt để hơn.
I.7: Tình hình nghiên cứu và sản xuất chitin trên thế giới
và ở Việt Nam
I.7.1: Tình hình nghiên cứu và sản xuất chitin trên thế giới
Trước đây, người ta đã thử chiết tách chitin từ thực vật biển nhưng nguồn
nguyên liệu không đủ để đáp ứng nhu cầu. Trữ lượng chitin phần lớn có nguồn gốc từ
vỏ tôm, cua. Trong một thời gian, các chất phế thải này không được thu hồi mà lại thải
ra ngoài gây ô nhiễm môi trường. Năm 1977 Viện kỹ thuật Masachusetts (Mỹ) khi tiến
hành xác định giá trị của chitin và protein trong vỏ tôm, cua đã cho thấy việc thu hồi
các chất này có lợi nếu sử dụng trong công nghiệp. Phần protein thu được sẽ dùng để
chế biến thức ăn gia súc, còn phần chitin sẽ được dùng như một chất khởi đầu để điều
chế các dẫn xuất có nhiều ứng dụng trong lĩnh vực công nghiệp [7].
Gần đây xuất hiện nhiều nghiên cứu tập trung vào việc sản xuất bột đầu tôm
bằng phương pháp sử dụng enzym proteaza (Synowwiecki và Al – Khateeb, 2003;
Mizani, 2005; Helenice Duarteda Holanda and Netto F.M, 2006) [9]. Quá trình thủy
phân protein đầu tôm bằng phương pháp enzym cho kết quả khả quan. Thủy phân đầu
tôm bằng chế phẩm alcalaza thu được dịch thủy phân có nhiều các axit amin không
thay thế rất thích hợp cho thức ăn gia súc (Mizani, 2005) [11] và tăng khả năng thu hồi
protein trong dịch thủy phân và có thể dùng làm thức ăn cho cá [12], [13]. Mizani và
Aminari đã chỉ ra rằng dùng enzym proteaza có thể tăng khả năng thu hồi protein từ
37% lên 45,7% [14]. Dịch thủy phân thu được bằng phương pháp sinh học có chứa các
peptit có hoạt tính sinh học có thể dùng trong sinh học [12]. Thời gian thủy phân bằng
enzym ngắn hơn phương pháp lên men. Enzym proteaza thường được dùng là papain,
bromelain, pancreatin, chế phẩm alcalaza. Ưu điểm của phương pháp này là ngoài dịch
thủy phân có thể thu hồi đồng thời chất sắc tố astaxanthin và chitin.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
16
Đồ án tốt nghiệp
Các nhận xét được trình bày dưới đây về các quy trình sản xuất chitin của tác
giả Trần Thị Luyến.
a. Quy trình sản xuất chitosan từ vỏ tôm hùm của Hackman
Vỏ tôm hùm
Ngâm HCl 2M, nhiệt độ phòng, = 5 giờ, w/v = 1/ 10
Rửa trung tính, sấy khô, nghiền mịn
Ngâm HCl 2M, nhiệt độ phòng, = 48 giờ, w/v = 1/ 2,5
Ly tâm
Rửa trung tính
Ngâm NaOH 1M, T =100 0C, = 42 giờ, w/v = 1/ 2,5
Ly tâm
Rửa trung tính
Ngâm NaOH 1M, T =100 0C, = 12 giờ, w/v = 1/ 2,5
Ly tâm
Rửa sạch bằng ly tâm
Sấy khô
Chitin dạng bột màu kem
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
17
Đồ án tốt nghiệp
Nhận xét:
Quy trình này gồm nhiều công đoạn, thời gian sản xuất kéo dài 65 giờ nên chỉ
có ý nghĩa trong công tác nghiên cứu thí nghiệm vì khi đưa ra sản xuất đại trà thì thiết
bị cồng kềnh, tốn kém, hóa chất đắt tiền, dễ hao hụt khi sản xuất
I.7.2: Tình hình nghiên cứu và sản xuất chitin ở Việt Nam
Việc nghiên cứu, sản xuất chitin- chitosan và các ứng dụng của chúng trong sản
xuất phục vụ đời sống là một hướng nghiên cứu tương đối mới mẻ ở nước ta. Vào
những năm 1978 đến 1980 Trường đại học Thủy sản Nha Trang đã công bố quy trình
sản xuất chitin – chitosan của kỹ sư Đỗ Minh Phụng, nhưng chưa có ứng dụng cụ thể
trong sản xuất. Gần đây, trước yêu cầu xử lý phế liệu thủy sản đông lạnh đang ngày
càng cấp bách, trước những thông tin kỹ thuật mới về chitin – chitosan cũng như tiềm
năng thị trường của chúng đã thúc đẩy các nhà khoa học của chúng ta bắt tay vào việc
nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất chitin – chitosan ở bước cao hơn, đồng thời
nghiên cứu các ứng dụng của chúng trong các lĩnh vực sản xuất công nghiệp.
Hiện nay, Việt Nam có nhiều cơ sở khoa học đang nghiên cứu sản xuất chitin –
chitosan như: Trường đại học Nông lâm thành phố Hồ Chí Minh; Trung tâm nghiên
cứu polymer – Viện khoa học Việt Nam; Trung tâm công nghệ và sinh học thủy sản –
viện nghiên cứu và nuôi trồng thủy sản 2.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
18
Đồ án tốt nghiệp
a. Quy trình của GVC Đỗ Minh Phụng-Đại học Nha Trang (1980)
Vỏ tôm khô
Ngâm HCl 6N, nhiệt độ phòng,
= 48 giờ, w/v = 1/ 2,5
Rửa trung tính
Ngâm NaOH 8%, T = 100 0C,
= 48 giờ, w/v = 1/ 2,5
Rửa trung tính
Tẩy màu
chitin
Nhận xét:
-
Ưu điểm: Sản phẩm có chất lượng khá tốt, chitin có màu sắc đẹp.
Nhược điểm: Sử dụng nhiều chất oxy hóa do đó dễ ảnh hưởng đến độ nhớt của
sản phẩm, thời gian xử lý dài.
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
19
Đồ án tốt nghiệp
b. Quy trình sử dụng enzym papain để sản xuất chitosan của PGS – TS Trần Thị Luyến
ĐHTS Nha Trang.
Vỏ tôm
Vỏ tôm
Ngâm HCl 10%, nhiệt độ
phòng, 5 giờ, w/v = 1/10
Ngâm HCl 10%, nhiệt độ
phòng, 5 giờ, w/v = 1/10
Rửa trung tính
Khử protein
Rửa sạch
Làm khô
chitin
Nhận xét:
Quy trình Papain cho sản phẩm có độ nhớt cao hơn các quy trình khác. Đặc
biệt độ deacety, độ tan và hiệu suất quy trình có ưu thế hơn hẳn. Để nâng cao chất
lượng chitosan có thể sử sụng enzyme papain thay thế cho NaOH để khử protein trong
vỏ tôm. Đặc biệt dịch thủy phân thu được sử dụng cho các mục đích thu hồi protein và
tận dụng. Điều đó chắc chắn mang lại hiệu quả cao. Tuy nhiên cần nghiên cứu quá
Võ Thị Duyên – CNTP3 – K50
20
- Xem thêm -