VI N HÀN LÂM KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI T NAM
C VI N KHOA H C VÀ CÔNG NGH
NGÔ QU C LUÂN
Công trình
c hoàn thành t i: Vi n Công ngh Hóa h c, Vi n Hàn lâm
Khoa h c và Công ngh Vi t Nam
Ng i h ng d n khoa h c:
1. PGS.TS. Nguy n Ng c H nh
2. GS.TS. Nguy n Kim Phi Ph ng
Ph n bi n 1:
Ph n bi n 2:
Ph n bi n 3:
KH O SÁT THÀNH PH N HÓA H C
CÂY Ô MÔI (CASSIA GRANDIS L.F), H
U
(FABACEAE)
NG B NG SÔNG C U LONG
Chuyên ngành: Hóa h c các h p ch t thiên nhiên
Mã s : 62.44.01.17
Lu n án s
c b o v tr c H i ng ánh giá lu n án ti n s c p H c vi n
p t i Vi n Công ngh Hóa h c, Vi n Hàn lâm Khoa h c và Công ngh
Vi t Nam, 01 M c nh Chi, Ph ng B n Nghé, Qu n 1, TP. H Chí Minh.
Vào h i
gi
phút
ngày tháng n m 2017.
TÓM T T LU N ÁN TI N S HÓA H C
TP. H Chí Minh - n m 2017
Có th tìm lu n án t i:
- Th vi n Qu c Gia Vi t Nam
- Th vi n H c vi n Khoa h c và Công ngh .
DANH M C CÔNG TRÌNH KHOA H C Ã CÔNG B
T QU NGHIÊN C U TRONG PH M VI LU N ÁN
1. Ngô Qu c Luân, ào Huy Phong, Tr ng Th Thu Th y, Mai ình Tr , Lê Ti n D ng, Ph m
Th Nh t Trinh, Nguy n Ng c H nh (2012), “H p ch t flavonoid t lá ô môi-Cassia grandis
L.f”, p chí Khoa h c và Công ngh , T p 50(3A), tr. 296–301.
2. Ngô Qu c Luân, Lê
Huy,
Hoàng Vinh, Ngô Kh c Không Minh và Nguy n Ng c H nh
(2013), “Phân l p và nh n danh hai h p ch t t d ch chi t ethyl acetate c a trái ô môi Cassia
grandis L.f”, p chí Khoa h c Tr ng i h c C n Th , S 26, tr. 30–34.
3. Ngô Qu c Luân, Ngô Kh c Không Minh, Nguy n Th Thùy Trang, Tr ng Cao Thu n, Mai
ình Tr , Lê Ti n D ng, Nguy n Ng c H nh (2013), “Kh o sát thành ph n hóa h c cao etyl
axetat v cây ô môi (Cassia grandis L.f)”, p chí Hóa h c, T p 51(6ABC), tr. 135–140.
4. Ngô Qu c Luân, V Duy Khánh, Ngô Kh c Không Minh, Lê Ti n D ng và Nguy n Ng c
nh (2013), “Phân l p m t s h p ch t t lá và v cây ô môi (Cassia grandis L.f)”, p chí
phân tích Hóa, Lý và Sinh h c, T p 18(4), tr. 101–108.
5. Ngô Qu c Luân, Hu nh Minh Ti n, V Duy Khánh, Lê Ti n D ng và Nguy n Ng c H nh
(2013), “Ba h p ch t flavonoid t lá ô môi (Cassia grandis L.f)”, p chí khoa h c Tr ng
i h c C n Th , S 29a, tr. 111–116.
6. Ngô Qu c Luân, Lê V n Ril,
Hoàng Vinh, Ngô Kh c Không Minh và Nguy n Ng c H nh
(2014), “Ba h p ch t t cao ethyl acetate c a trái ô môi (Cassia grandis L.f)”, p chí khoa
c Tr ng i h c C n Th , S 30a, tr. 15–19.
7. Ngô Qu c Luân, Hu nh Th Phi Y n, Nguy n Thanh Hoài Nhân, Ngô Kh c Không Minh và
Nguy n Ng c H nh (2014), “D n xu t xanthone m i t r cây ô môi (Cassia grandis L.f)”,
p chí khoa h c Tr ng i h c C n Th , S 31a, tr. 72–75.
8. Ngô Qu c Luân, Nguy n V n Ki t, Ngô Kh c Không Minh, Nguy n T n Phát, Phùng V n
Trung, Lê Ti n D ng, Nguy n Ng c H nh (2014), “M t s h p ch t t trái ô môi (Cassia
grandis L.f)”, p chí Khoa h c và Công ngh , T p 52(5A), tr. 174–179.
9. Ngo Quoc Luan, Huynh Thi Phi Yen, Ngo Khac Khong Minh, Phung Van Trung, Phan Nhat
Minh, Nguyen Tan Phat, Mai Dinh Tri, Le Tien Dung, Nguyen Ngoc Hanh (2014), “Natural
compounds from the root of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 52(5),
pp. 646–650.
10. Ngo Quoc Luan, Vu Duy Khanh, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh, Nguyen Tan
Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2015), “New benzophenone derivative
from leaves of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 53(6e), pp. 338–341.
11. Ngo Quoc Luan, Vu Duy Khanh, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh, Nguyen Tan
Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2015), “Novel naphthalene glycoside
derivative from leaves of Cassia grandis L.f”, Can Tho University Journal of Science, Vol. 1,
pp. 10–13.
12. Ngo Quoc Luan, Nguyen Thi Thuy Trang, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh,
Nguyen Tan Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2016), “Isolation and
characterization of three natural compounds from the stem bark of Cassia grandis L.f”, Can
Tho University Journal of Science, Vol. 3, pp. 57–60.
13. Ngo Quoc Luan, Ngo Khac Khong Minh, Nguyen Ngoc Hanh (2016), “Flavonoids from the
fruit of Cassia grandis L.f”, Journal of Science and Technology, Vol. 54(2B), pp. 26–31.
14. Ngo Quoc Luan, Nguyen Cong Tao, Vu Thi Hoai Tien, Nguyen Ba Nghia, Le Tien Dung, Mai
Dinh Tri, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2016), “Natural compounds from
seeds of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 54(2), pp. 257–262.
15. Lê Ti n D ng, Mai ình Tr , Ph m Th Nh t Trinh, Ngô Qu c Luân (2013), “ nh l ng h p
ch t epicatechin trong lá ô môi (Cassia grandis L.f)”,
y u H i ngh hóa h c toàn qu c l n
th 6 (21-22/11/2013), tr. 284–290.
-1-
-24-
I. GI I THI U LU N ÁN
1.
tv n
Cây ô môi (Cassia grandis L.f) là loài th c v t
i
ng b ng sông C u Long. Theo các t
Hoàng H ,
có d
n v cây thu c (Ph m
Huy Bích) và kinh nghi m dân gian
c tính và m t s công d ng nh : lá t
ki t l , qu chín ch a au x
trình nghiên c u hi n
ts n
c bi t t n t i lâu
Vi t Nam thì ô môi
i tr h c lào, qu xanh ch a
ng, nh c m i. Trong khi ó, ch a có công
i nào
c công b trên
it
ng này.
c trên th gi i c ng có ô môi nh t là Nam M , n i
c
cho là ngu n g c c a loài ô môi. Ngoài các công d ng dân gian nh
Vi t Nam, ng
i v i ng
i ta còn cho bi t c m qu ô môi chín có tác d ng r t t t
i b b nh thi u máu. Các nghiên c u hi n
i ph c v y h c
nhi u nh t là xoay quanh m t s ho t tính sinh h c nh kh n ng kháng vi
sinh v t trên tôm n
c m n, kháng ái tháo
ng, kháng oxi hóa, b o v
gan, kháng viêm, gi m au… Bên c nh ó, các nghiên c u hóa h c c ng
ch m i phân l p
nghiên c u, ch a
Vì v y
c kho ng 20 h p ch t. Nh v y, cây ô môi còn ít
c s gi i thích các tác d ng d
c lý c a loài này.
tài “Kh o sát thành ph n hóa h c cây ô môi (Cassia
grandis L.f), h
u (Fabaceae)
ng b ng sông C u Long”
th c hi n nh m góp ph n gi i quy t v n
2. Ý ngh a khoa h c và th c ti n c a
c
nêu trên.
tài
- K t qu nghiên c u thành ph n hóa h c nh m góp thêm nh ng hi u bi t
hóa th c v t c a loài ô môi
các tác d ng d
gi i thích
c lý và làm c s cho các nghiên c u ti p theo.
-Trên c s thành ph n hóa h c
nh m h
Vi t Nam, làm c s lý lu n
c bi t, th nghi m ho t tính sinh h c
ng g n h n t i nh ng ng d ng ph c v
i s ng xã h i.
3. M c tiêu và nhi m v nghiên c u c a lu n án
3.1
c tiêu
- Phân l p, tìm hi u c u trúc hóa h c c a các h p ch t tinh khi t t cây ô
môi, tìm ki m các h p ch t t nhiên có c u trúc m i, góp ph n b sung d
-23-
-2li u hóa th c v t c a loài.
8 H p ch t l p l i so v i các công b tr
c ây
loài ô môi g m
- Th nghi m ho t tính sinh h c c a m t s cao chi t, m t s h p ch t
quercitrin (8), nicotiflorin (10), rutin (11), (-)-epiafzelechin (15), (-)-
tinh khi t tùy theo c u trúc hóa h c
epicatechin (16), aloe-emodin (17), chrysophanol (19) và -sitosterol (27).
góp ph n gi i thích tác d ng d
c
lý c a loài ô môi.
3.
3.2 Nhi m v nghiên c u c a lu n án
aloe-emodin có ho t tính gây
-Phân l p ít nh t 20 h p ch t tinh khi t t các cao chi t, trong ó có ít
G2, Lu, RD và 1 dòng t bào th
nh t 1 h p ch t m i.
9,29; 9,81 và 9,92 µg/mL. Phân
-Xác
nh c u trúc các h p ch t phân l p
lá ô môi có ho t tính kháng
c.
-Th m t s ho t tính sinh h c c a các phân
ã th nghi m m t s ho t tính sinh h c, k t qu cho th y h p ch t
n chi t và h p ch t tinh
i v i các dòng t bào ung th Hep-
ng Vero v i giá tr IC50 t
ng ng 6,20;
n chi t H:E 1:1 và h p ch t quercitrin
c vi khu n P. acnes gây m n tr ng cá
t nh t trong các m u th v i giá tr MIC l n l
t là 0,3 và 0,2 mg/mL.
KI N NGH
khi t.
Trên c s phân tích t ng quan và các k t qu có
4. Nh ng óng góp m i c a lu n án
1. Lu n án là công trình
u tiên c a Vi t Nam nghiên c u v thành ph n
hóa h c trên 5 b ph n: lá, v thân, r , trái và h t c a cây ô môi
ng sông C u Long; phân l p
2. K t qu phân l p và xác
ng
nh c u trúc óng góp
c 34 h p ch t vào
a chi Cassia và 4 h p ch t vào kho c u trúc phân t h u c trên th gi i
(xem ph n k t lu n).
c,
ngh :
1. Ti p t c phân l p thêm các h p ch t t t t c các b ph n c a cây ô
môi,
p
c 42 h p ch t t nhiên.
li u hóa th c v t c a loài ô môi, 19 h p ch t vào d li u hóa th c v t
3. L n
c
c bi t là các cao ch a
c kh o sát ho c còn ít s h p ch t phân
c nh các cao n-BuOH, cao n
c c a r , v và h t ô môi
có k t
qu toàn di n h n v thành ph n hóa h c c a loài Cassia grandis L.f,
nh m xem xét kh n ng khai thác s d ng làm d
c li u.
2. Ti p t c có nh ng nghiên c u phát tri n và ánh kh n ng c ch vi
khu n P. acnes và vi khu n gây m n khác trên nh ng ch ph m làm t
u tiên m t s phân
n chi t lá ô môi
c th ho t tính kháng
cao LE và phân
n H:E (1:1) t lá ô môi, ti n
nb
c
u th nghi m
vi khu n Propionibacterium acnes (P. Acnes) gây m n tr ng cá. K t qu
lâm sàng trong
cho th y phân
sinh v t, kháng oxy hóa và các ho t tính sinh h c khác c a các s n ph m
n chi t H:E 1:1 và h p ch t quercitrin th hi n ho t tính
kháng virus P. acnes m nh v i giá tr MIC l n l
t là 0,3 và 0,2 mg/mL.
Lu n án g m 129 trang chính v i 10 s
tài li u tham kh o. B c c c a lu n án: M
Ch
chi t và phân l p t cây ô môi nh m tìm ki m thêm các kh n ng ng
ng khác t cây ô môi.
5. B c c c a lu n án
quan (24 trang), Ch
u tr m n tr ng cá. Ti p t c kh o sát ho t tính kháng vi
ng 2: Ph
, 55 b ng s li u, 19 hình, 277
u (2 trang), Ch
ng 1: T ng
ng pháp và th c nghi m (25 trang),
ng 3: K t qu và bàn lu n (76 trang), K t lu n và ki n ngh (2 trang).
Các trang th t c và tài li u tham kh o (42 trang), ph l c (214 trang).
-3-
-22-
II. N I DUNG LU N ÁN
T LU N VÀ KI N NGH
u: Ph n m
T LU N
y
các n i dung nghiên c u, trong ó
i dung tr ng tâm là kh o sát thành ph n hóa h c cây ô môi (Cassia
grandis L.f) thu hái
ã kh o sát
ng b ng sông C u Long:
nh tính thành ph n hóa h c 5 b ph n lá, v thân, r ,
trái và h t; k t qu cho th y có s hi n di n c a h u h t 9 nhóm h p ch t
nhiên l n: flavonoid, anthranoid, alkaloid, steroid, terpenoid, glycoside,
tannin, saponin, coumarine.
2.
ã phân l p và xác
n ý ngh a khoa h c, tính th c ti n,
casgranone
C
30 H p ch t ã bi t
CH
NG 1: T NG QUAN
Ph n t ng quan t p h p các nghiên c u trong n
1.1 GI I THI U V CHI CASSIA
1.1.1
c
c và trên th gi i, g m:
m th c v t c a chi Cassia
1.1.2 Các nghiên c u v thành ph n hóa h c
1.1.3 Các nghiên c u v ho t tính sinh h c và kh n ng ng d ng
1.2.1 Phân lo i khoa h c
(41)
và
2,3-dihydroxypropyl
25-
1.2.2
c
m th c v t c a loài Cassia grandis
1.2.3 Công d ng theo y h c dân gian
1.2.4 Tình hình nghiên c u
hydroxypentacosanoate (22).
các loài khác nh ng m i phát hi n
loài ô môi
m apigenin (1), apigetrin (2), kaempferol (3), astragalin (4), afzelin (5),
quercetin (6), isoquercetin (7), ombuin (9), luteolin (12), cynaroside (13),
1.2.5 Nh n xét t ng quan
CH
octacosanoate (21), di-(2,3-dihydroxypropyl) tetracosandioate (23),
-
adenosine (24), D-mannitol (25), (+)-lyoresinol (26), daucosterol (28),
brassicasterol-3-O- -D-glucopyranoside (29), lupeol (30), axit betulinic
NG 2: PH
2.1
IT
it
vitexin (14), axit parietinic (18), pulmatin (20), 2,3-dihydroxypropyl
NG PHÁP VÀ TH C NGHI M
NG NGHIÊN C U
ng nghiên c u là cây ô môi (Cassia grandis L.f.)
các t nh
Tr ng, Cà Mau) t n m 2011 n 2014. M u th c v t
Minh Quân,
i h c C n Th giám
2.2 PH
NG PHÁP NGHIÊN C U
2.2.1 Ph
ng pháp
(35), axit cinnamic (36), -L-rhamnopyranoside (38), casgranone A (39)
Ph
và moracin B (42).
tr ng.
Trong 30 h p ch t này có 15 h p ch t l n
u tiên
c phân l p t chi
ng pháp kinh
2.2.2 Ph
c thu hái
ng b ng sông C u Long (An Giang, V nh Long, C n Th , Sóc
(31), axit oleanolic (32), axit gallic (33), axit vanillic (34), axit o-anisic
Cassia.
i
1.2 GI I THI U CÂY Ô MÔI
nh c u trúc c a 42 h p ch t tinh khi t t các b
ph n cây ô môi. Trong ó có:
4
p ch t t nhiên m i g m casgrandxanthone A (37), casgranone B
(40),
c p
ng, m c tiêu và nhi m v nghiên c u c a lu n án.
tài ã th c hi n áp ng
1.
u
c TS.
ng
nh tên khoa h c.
nh tính các nhóm h p ch t t nhiên
n, dùng các ph n ng hóa h c cho hi n t
ng
ng pháp chi t xu t
Chi t r n-l ng (ngâm d m), l ng-l ng v i các dung môi h u c theo th
t ng d n
phân c c. Cô lo i dung môi d
i áp su t kém.
c
-21-
-42.2.3 Ph
ng pháp phân l p các h p ch t
Ph i h p các ph
ng pháp s c ký bao g m: s c ký l p m ng (TLC), và
c ký c t (SKC) pha th
2.2.4 Ph
Ph
o.
3.3.1 Ho t tính gây
ng pháp xác nh c u trúc
ng pháp chung
p gi a các
Ph kh i l
ng và pha
c
xác
nh c u trúc hóa h c c a các h p ch t là k t
m lý-hóa v i các ph
ng pháp ph hi n
ng phân gi i cao (HR-MS), ph c ng h
i bao g m:
ng t nhân (NMR),
quay c c ([ ]D).
trên các dòng HepG2, Lu, RD và Vero theo ph
ng pháp c a Skehan và
ng s (1991) và Likhiwitayawuid và c ng s (1993).
n chi t và
ng pháp khuy ch tán trên gi ng
th ch c a c a Saranraj P. et al. (2010).
-Các h p ch t chrysophanol, pulmatin cho k t qu âm tính v i 2 dòng t
Các phân
th y phân
c t bào
n H:E 1:1 và h p ch t quercitrin th hi n ho t tính kháng t t
i giá tr MIC l n l
t là 0,3 và 0,2 mg/mL.
c và tóm t t
10 s
2.1-2.10.
c ti n hành t i Vi n Hóa h c các
p ch t thiên nhiên, Vi n Hàn lâm Khoa h c và Công ngh Vi t Nam t i
Hà N i. Ho t tính kháng vi khu n P. acnes
Nghiên c u và Phát tri n công ngh sinh h c, Tr
nh c u trúc
c 42
p ch t (không k các h p ch t trùng l i gi a các b ph n). Các h p ch t
NGHI M HO T TÍNH SINH H C
Th nghi m ho t tính gây
kháng v i clindamycin và erythromycin), k t qu cho
5 b ph n c a cây ô môi ã phân l p và xác
Ph n này mô t chi ti t vi c phân l p các h p ch t t 5 b ph n c a cây,
2.5 QUÁ TRÌNH TH
u
c th trên 9 dòng vi khu n P.
3.3 NH N XÉT CHUNG V CÁC K T QU NGHIÊN C U
2.4 QUÁ TRÌNH PHÂN L P CÁC H P CH T
n chi t
n chi t n-hexane, EtOAc, MeOH và các h p ch t aloe-
emodin, rutin, quercitrin t lá ô môi
NH TÍNH CÁC NHÓM H P CH T
i b ph n g m 2 phân
ng ng là 6,20; 9,29; 9,81 và 9,92 g/mL.
t qu này phù h p v i công b c a A. Yordanova [19].
Acnes (t t c
-Th ho t tính kháng vi khu n P. Acnes c a m t s phân
2.3 QUÁ TRÌNH
RD và Vero v i giá tr IC50 t
3.3.2 Ho t tính kháng vi khu n P. Acnes
c t bào c a các h p ch t nhóm anthraquinone
p ch t quercetin t lá ô môi b ng ph
c t bào
bào HepG2 và Lu.
ng pháp th ho t tính sinh h c
-Kh o sát kh n ng gây
HO T TÍNH SINH H C
-H p ch t aloe-emodin cho k t qu kháng t t 4 dòng t bào HepG2, Lu,
ph t ngo i (UV), ph h ng ngo i (IR),
2.2.5 Ph
3.3 K T QU TH
c ti n hành t i Vi n
ng
i h c C n Th .
phân l p có th x p vào các nhóm: flavonoid (16 h p ch t); anthraquinone
(6 h p ch t); polyalcol và glyceryl ester m ch dài bão hòa (4 h p ch t);
n xu t m t vòng benzene (4 h p ch t); triterpene (3 h p ch t); sterol (3
p ch t); xanthone (1 h p ch t); lignan (1 h p ch t); alkaloid (1 h p
ch t); benzophenone (1 h p ch t);
ng (1 h p ch t); benzofuran (1 h p
ch t). Do v y các h p ch t phát hi n t loài ô môi khá a d ng,
ng phù h p v i k t qu
u này
nh tính s b thành ph n hóa h c.
Cao chi t EtOAc và quercitrin t lá ô môi th hi n ho t tính m i phát
hi n là kháng vi khu n gây m n tr ng cá t t h n m t s thu c kháng sinh
hi n dùng. K t qu này c ng là m t trong các minh ch ng t
tác d ng y h c dân gian c a lá ô môi là dùng
da.
ng t cho
ch a h c lào, b nh ngoài
-20trí 1 và 8 c a khung s
nhóm OH
H 5,09 t
-5-
n naphthalene có mang 2 nhóm OH, trong ó
v trí 8 liên k t v i nhóm
ng rutinose b i proton anomer
ng quan v i carbon t c p vòng th m mang oxygen
Ph HMBC xác nh n proton không ghép c p
methyl
H
2,30
135,3 và carbon methine
n naphthalene
C-3 (
ng quan v i C-2;
ng quan v i carbon t c p vòng th m
C
C
-Ngâm d m, chi t nóng (50 C) v i EtOH 96%
-L c, cô c n d i áp su t th p
C 157,4.
6,93 và m t nhóm
H
u thu c vòng A vì chúng cùng có t
nhóm methyl này c ng có t
T NGUYÊN LI U
Bã chi t
Cao EtOH
C
-Phân tán trong n c m, chi t v i n-hexane
-Cô c n d i áp su t th p
119,7 ch ng t nhóm này g n vào khung
135,3). Vì v y, ngoài H-4 (
H
6,93), hai 2
Ph n không tan
trong n-hexane
Cao n-hexane
proton vòng th m còn l i thu c vòng B. Trên vòng B có m t carbon t
p vòng th m mang oxygen
meta
H
C
6,94 và 6,73 ch ng t hai proton này ph i
nh v y nhóm OH g n vào C-6 (
C
các v trí 5 và 7; và
c
ngh nh Hình 3.16, c u
ng t c u trúc h p ch t 5-hydroxydianellin
(B ng 3.2.7.2), nh ng khác là
p ch t 41 thì nhóm OH g n
-Chi t v i n-BuOH bão hòa n
-Cô c n d i áp su t th p
tài li u [57]
h p ch t này t i C-5 g n nhóm OH còn
C-6.
Ph n không tan
trong EtOAc
Cao EtOAc
158,2).
Nh v y, c u trúc c a h p ch t 41
trúc này t
-Chi t v i EtOAc
-Cô c n d i áp su t th p
158,2 và hai proton methine ghép c p
ây là h p ch t có c u trúc m i
c ki m tra b ng ph n m m SciFinder ngày 07-04-2014 45) và
Cao n-BuOH ho c
Cao acetone
c ho c acetone
Ph n không tan
trong n-BuOH ho c acetone
-Cô c n d
i áp su t th p
c
t tên là casgranone C.
Cao n
2.1 Quy trình chung
c
u ch các cao chi t t các b ph n cây ô môi
Cao BuOH r cây ô môi
(RB, 35 gam)
C:M 95:5
RB1
RB2
RB3
RB4
1,0 g
4,0 g
4,0 g
23,0 g
C:M 9:1
Hình 3.16 T
ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 41
Ghi chú:
C:M 95:5
RB14
RB23
0,13 g
0,08 g
9:1
CGRB01
(18)
CGRB02
(37)
12 mg
10 mg
-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.
2.6 Phân l p các h p ch t t cao n-BuOH r cây ô môi
-6-
-19u trúc này
Cao n c lá ô môi
(LM, 290 g)
E:M:W 20:1:1
2014 t i
c ki m tra b ng ph n m m SciFinder ngày 07-04-
i h c Reims Champagne-Ardenne (Pháp) cho bi t ây là c u
10:1:1
trúc m i. Do ó, là h p ch t 40 là h p ch t m i trong t nhiên và
LM1
29 g
LM2
27,6 g
LM3
34 g
E:M 50:1
LM4
30 g
LM5
28,7 g
10:1
LM25
821 mg
3:1
LM223
300 mg
C:M 8:1
LM2243
489 mg
LM266
1,3 g
3:1
C:M 10:1
LM2533
114 mg
C:M 12:1
C:M 9:1
C:M 10:1
3:1
LM253
300 mg
C:M 9:1
C:M 9:1
LM26
7,0 g
C:M 10:1
LM224
1,3 g
LM2232
120 mg
LM2662
776 mg
3:1
C:M 10:1
C:M 9:1
LM22322
36 mg
LM22432
319 mg
LM25332
20 mg
LM25334
16 mg
Ghi chú:
CGLM07
(40)
13 mg
CGLM04
(8)
49 mg
LM25336
18 mg
CGLM09
(41)
9 mg
CGLM08
(10)
12 mg
LM26622
260 mg
CGLM01
(11)
45 mg
-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai n cu i là k t tinh l i.
2.3 Phân l p các h p ch t t cao n
c lá ô môi
Cao EtOAc r cây ô môi
(RE, 300 gam)
H:E 10:0
Các
c tính lý hóa và d li u ph UV, IR (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u
trúc có h liên h p, ph IR cho th y m t s dao
RE2
19,8 g
RE3
21,4 g
RE4
26,4g
H:E 95:5
H:E 9:1
H:E 8:2
RE23
4,5 g
RE33
1,8 g
RE42
2,0 g
H:E 95:5
RE233
34 mg
H:E 9:1
RE334
54 mg
H:E 8:2
RE423
100 mg
RE5
67,0 g
H:E 7:3
0:10
RE54
5,0 g
H:E 7:3
5:5
ng
c tr ng c a các n i O-H,
C=O, C-O, C-C... H p ch t 41 còn cho ph n ng d
ng tính v i thu c th
FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 563,1747 [M+Na]+ (tính
toán lý thuy t: [C25H32O13+Na]+ = 563,17406), phù h p v i công th c
phân t C25H32O13 (540,18 vC).
1
H-NMR (CD3OD, 500 MHz) xu t hi n các tín hi u c a 3
proton vòng th m trong ó g m 2 proton ghép meta
H
2,30. Ngoài ra là các tín hi u proton c a 1
nv
13
C:M 9:1
RE62
2,7 g
C:M 8:2
RE7
13,8 g
RE8,9
57,8 g
C:M:W 8,5:1,5:0,1
RE72
1,5 g
8:2:0,1
C:M:W 8:2:0,1
RE542
67 mg
RE622
65 mg
RE722
90 mg
RE725
60 mg
CGRE01
(26)
7,2 mg
CGRE05
(15)
15 mg
CGRE04
(25)
15 mg
CGRE06
(34)
10 mg
C
CGRE02
(31)
32 mg
CGRE03
(32)
20 mg
Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.
2.5 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc r cây ô môi
nv
20,3) và 2 carbon c a nhóm acetyl (
ng
C
32,6
và 208,3); còn l i là 10 carbon vòng th m trong ó có 3 carbon methine, 3
carbon t c p mang oxygen và 4 carbon t c p không mang oxygen.
t h p v i CTPT d
chi m 3
C:M:W 8:2:0,1
H
C-NMR (CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT và ph
HMBC cho th y có t ng s 25 carbon g m 12 carbon c a
RE6
30,1 g
2,61 và
5,08 (8,0 Hz) và 4,77 (1,5 Hz) là các proton anomer.
Ph
0:10
H
ng rutinose v i
oán (10
b t bão hòa), rutinose và acetyl
b t bão hòa, v y 10 carbon vòng th m (5
b t bão hòa) ph i
ghép thành 2 vòng thành 1 phân t naphthalene.
Ph HMBC (Hình 3.16) cho th y nhóm methyl
CGRE07
(30)
9,1 mg
6,94 và 6,73 (2,0
Hz) và m t proton không ghép spin 6,93 (s); 2 nhóm methyl
rutinose, 1 nhóm methyl (
RE1
12,1 g
t
tên là casgranone B (Hình 3.8).
Ph
CGLM03
(5)
12 mg
c
3.2.2.4 H p ch t 41 (casgranone C)
LM22
4,5 g
C:M 10:1
LM6
109,7 g
quan v i carbon carbonyl
vòng A c a khung s
2,61 c ng t
C
H
2,61 có t
ng
208,3 h p thành nhóm acetyl và g n vào
n naphthalene
v trí 2 b i protron nhóm methyl
ng quan v i carbon t c p vòng th m
C
123,3 (C-2).
H
v
nhóm OH
Ph HMBC cho th y proton anomer c a
ng tác v i C-1 (
C
dihydroxybenzoyl) benzoate.
nv
y c u trúc c a h p ch t 40 ch khác h p ch t (39)
Methyl 3-O-glucopyranosyl-5-hydroxymethylene-2-(2,6ng -D-glucoside
155,0) c a khung c u trúc h p ch t (39) (Hình 3.8).
ch thay th
C-1 b ng nhóm O-glucosyl (xem d li u ph NMR
B ng
3.2.2.3), có th xem là ch t chuy n hóa ti p theo sau h p ch t (39) do s
thay th nhóm OH b ng nhóm O-glucosyl. H p ch t 40 có tên IUPAC là:
2.2 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc lá ô môi
CGLE20
(39)
29 mg
LE8223
80 mg
C:M 85:15
LE822
140 mg
C:M 85:15
LE82
2,0 g
C:M 85:15
LE8
8,7 g
CGLE05
(5)
31 mg
LE1012
82 mg
C:M 7:3
LE101
1,0 g
C:M 7:3
LE102
2,0 g
LE10
3,8 g
CGLE04
(7)
8,3 mg
LE114344
60 mg
C:M 7:3
LE11434
153 mg
C:M 7:3
LE1143
200 mg
C:M 7:3
LE114
0,4 g
phân c c; : gi m d n
CGLE11
(4)
12 mg
LE10232
35 mg
C:M 7:3
LE1023
111 mg
C:M 7:3
LE9
10,1 g
u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.
CGLE03
(6)
20 mg
CGLE08
(8)
6,7 mg
CGLE10
(16)
8 mg
CGLE02
(3)
20 mg
CGLE01
(17)
660 mg
LE6322
45 mg
C:M 9:1
0:1
LE5323
40 mg
C:M 85:15
LE632
70 mg
C:M 9:1
C:M 95:5
LE572
90 mg
LE63
1,3 g
C:M 9:1
LE7
12,4 g
H:E 1:0
LE57
2,9 g
LE6
16,4 g
Ghi chú: -Các quá trình phân l p không ghi sephadex ho c RP18 thì
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t không có ch
CGLE09
(15)
10 mg
LE563
30 mg
C:M 98:2
LE56
1,9 g
ng
LE5722
33 mg
C:M 95:5
LE532
180 mg
LE523
195 mg
LE554
800 mg
C:M 95:5
C:M 95:5
C:M 98:2
1–2 ppm do ghi ph trong dung môi khác v i h p ch t (39).
LE55
2,1 g
103,2 là carbon anomer. Các s li u có l ch kho ng
C:M 98:2
nv
LE53
2,3 g
C
m c 3.2.1) và 6 carbon c a 1
LE52
1,1 g
glucose trong ó
ng t h p ch t
LE5
15,8 g
tín hi u c a t ng s 22 carbon. Trong ó g m 16 carbon t
LE4
12,4 g
C-NMR (CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT cho các
LE3
14,3 g
ã bi t (39) (s li u ph
ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 40
LE2
15,6 g
Hình 3.8 T
LE1
11,2 g
Ph
13
Cao EtOAc lá ô môi
(LE, 155 g)
phân c c;
CGLE07
(10)
28 mg
Sephadex
E:M:W 15:1:1
LE1152
90 mg
E:M:W 20:1:1
LE115
1,3 g
C:M 7:3
LE11
2,6 g
CGLE06
(11)
11 mg
LE1163
103 mg
RP18, M:W
1:5 1:1
LE116
0,8 g
-18-7-
CGBE15
(42)
8 mg
BE7323
25 mg
C:M 97:3
BE732
90 mg
C:M 97:3
BE73
1,2 g
oán 2 carbon carbonyl
carboxyl. Còn l i 2 carbon t c p
1 và C-3 nh
CGBE13
(23)
10 mg
C
C
vòng B,
169,0 và 165,3 thu c 2 nhóm
135,4 và 137,0
so sánh v i d
CGBE06
(28)
1200 mg
CGBE03
(32)
660 mg
BE433
1800 mg
BE422
790 mg
C:M 95:5
C:M 98:2
BE223
309 mg
CGBE02
(31)
650 mg
CGBE01
(27)
130 mg
BE342
980 mg
5:5
H:E 8:2
H:E 8:2
2.4 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc v cây ô môi
c tính
c xác
nh là C-
li u NMR c a các h p ch t
d i hóa h c trên ph n m m Chemdraw 12.0. N u
2 nhóm carboxyl
v trí 2 và 4 thì th y không phù h p vì
carbon vòng A s thay
các
Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t không có ch
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.
CGBE12
(30)
26 mg
CGBE09
(18)
410 mg
CGBE10
(29)
440 mg
BE5332
530 mg
C:M 98:2
BE541
89 mg
BE533
870 mg
BE442
670 mg
93:7 C:M 99:1
C:M 95:5
BE53
3,5 g
BE44
3,3 g
BE43
3,9 g
BE42
2,7 g
BE34
2,8 g
BE22
1,5 g
kh o
CGBE05
(21)
18 mg
BE5434
29 mg
BE5423
45 mg
C:M 97:3
C:M 98:2
BE543
67 mg
BE542
113 mg
C:M 98:2
BE54
4,2 g
C:M 98:2 95:5
95:5
C:M 99:1
4:6
H:E 9:1
H:E 8:2
BE4
26,4 g
BE3
22,8 g
BE2
13,6 g
u không th y tín hi u
methylene và methyl k oxygen nào khác nhóm methoxyl g n
CGBE07
(22)
220 mg
BE544
480 mg
C:M 98:2 95:5
BE6
30,1 g
BE5
24,7 g
3:7
BE1
2,1 g
C-4; C-1 và C-3 . Ngoài ra, trên các ph
monodictyxanthone [37], griseoxanthone C [104] (B ng 3.2.7.1) và tham
H:E 9:1
Cao EtOAc v cây ô môi
(BE, 145 g)
-17-
cho phép d
BE7
3,8 g
BE8
3,6 g
BE9
4,2 g
-8-
c
i và nh v y H-1 s có t
i l i,
c a các
C
ng quan v i C-9.
m lý, hóa và ph nghi m ã phân tích nh trên k t h p
so sánh v i tài li u tham kh o cho phép xây d ng c u trúc h p ch t 37
nh Hình 3.14, tên IUPAC là 8-hydroxy-6-methoxy-9-oxo-9H-xanthene1,3-dicarboxylic. C u trúc hóa h c này
c ki m tra b ng ph n m m
SciFinder ngày 04-11-2013 45) cho bi t ây là h p ch t t nhiên m i,
t
tên là casgrandxanthone A, (Hình 3.15).
3.2.2.3 H p ch t 40 (casgranone B)
Các
c tính lý hóa và d li u ph UV, IR (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u
trúc có h liên h p, ph IR cho th y m t s dao
ng
c tr ng c a các n i O-H,
C=O, C-O, C-C... H p ch t 40 còn cho ph n ng d
ng tính v i thu c th
FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi
toán lý thuy t: [C22H25O12]+ = 481,1346), t
m/z 481,1245 [M+H]+ (tính
ng ng v i CTPT C22H24O12
(480,13 vC).
Ph
1
H-NMR (CD3OD, 500 MHz), xu t hi n các tín hi u c a n m
proton nhân th m
H
kho ng
H
6,3–7,8 (trong ó có m t c p t
6,32 Hz); hai proton nhóm oxymethylene
methoxy
H
hexose d ng
7,5 Hz).
H
H
ng
4,69 và ba proton nhóm
3,73. Ngoài ra còn có các tín hi u proton c a 1
t i vùng
ng
3,2–5,0 trong ó proton anomer có
nv
H
ng
4,92 (d;
i 2 carbon
C
C
118,8. T
ng t , proton
165,3 và 122,0 còn có t
118,8 và 154,3 cho phép xác
carbon
C
154,3 là C-4a, t
nhóm carboxyl
C
8,05 ngoài t
C
ây các carbon
c xác
vùng t tr
C
C
ng th p h n
CGFE11
(8)
10 mg
CGFE09
(13)
11 mg
CGFE05
(14)
8 mg
CGFE03
(2)
10 mg
FE1243
0,45 g
FE1152
0,25 g
FE1143
0,90 g
FE1022
0,65 g
C:M 85:15
C:M 9:1
C:M 9:1
C:M 85:15
FE114
3,6 g
FE102
2,5 g
C:M 85:15
CGFE10
(9)
15 mg
FE093
1,1 g
C:M 95:5
ng ng là C-9a; C-2;
CGFE07
(12)
16 mg
CGFE02
(28)
26 mg
CGFE01
(27)
16 mg
CGFE06
(1)
6 mg
FE0823
0,75 g
C:M 9:1
C:M 95:5
FE0632
0,65 g
FE082
2,6 g
FE063
2,3 g
nh
118,8; 122,0; 119,3 và 2
nh t
C:M 95:5
v trí
154,3 và 118,8. Trên khung
g n oxygen h n. Do v y có th xác
169,0; 165,3
FE08
14,0 g
ng quan
ng quan v i 2 carbon t c p
xanthone carbon t c p t i v trí 4a có giá tr
v trí 9a do
H
nh proton này g n v i carbon
ortho ho c meta so v i các carbon
so v i carbon
v trí ortho ho c meta
FE0522
0,70 g
7,75 g n v i carbon
v trí
2.7 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc trái ô môi
Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n phân c c;
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t không có ch
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.
so v i carbon
H
nh 2 nhóm carbonyl c ng
FE0432
0,75 g
meta v i nhau và proton
ng quan v i
CGFE04
(36)
50 mg
118,8 cho phép xác
119,3, v a có t
8,05, v a
C:M 95:5
C
C
H
C:M 95:5
ng quan v i carbon methine
carbon t c p
C
7,75 ghép c p meta v i proton
FE052
1,8 g
có t
H
FE022
1,2 g
vòng A, proton
FE043
2,1 g
ng hoàn toàn phù h p (Hình 3.15).
C:M 95:5
6,46 và 6,71
C:M 95:5
H
157,2 là C-
3:7
ng quan c a hai proton
C
C:M 98:2
nh là C-6. Nh v y
93,1 là C-5 và carbon t c p
4b. Ph HMBC cho th y t
167,1 ch ng
H:E 7:3
C
c xác
FE115
1,5 g
C:M 9:1
C:M 95:5
FE12
4,5 g
FE11
12,4 g
còn l i carbon methine
FE09
8,0 g
FE10
11,6 g
nhóm methoxyl g n v i carbon này và
C
FE07
6,3 g
ng quan duy nh t v i carbon
FE06
9,3 g
3,91) có t
103,6 là C-8a. Proton nhóm
FE05
10,7 g
H
C
162,4); và vì v y
FE04
12,5 g
methoxyl (
97,7 là C-7 và carbon
C
FE03
4,8 g
C
nh nhóm hydroxyl g n vào v trí C-8 (
162,4 và 103,6
FE02
14,7 g
carbon
C
FE01
8,5 g
cho phép xác
ng quan v i hai carbon t c p
0:10
97,7, v a có t
H:E 10:0
C
ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 37
Cao EtOAc trái ô môi
(FE; 168,5 g)
Hình 3.15 T
FE124
1,2 g
-9-
-16-
-15-
-10Cao n-BuOH trái ô môi
(FB, 150 g)
C:M 9:1
FB1
1,5 g
proton vòng benzene chia làm 2 c p
C:M 8:2
H:E E:M
FB43
5g
H
9:1
CGFB05 (33)
8 mg
C:M 95:5
6,46; J=2,0; 6,71;
H
3,91 và 1 proton nhóm hydroxyl ki m n i
12,29.
5:5
FB54
0,6 g
FB433
0,2 g
FB4333
10 mg
tr c ti p trên vòng benzene
FB5
19,2 g
E:M 98:2
H
J=2,0; 8,16; J=1,5 và 8,05; J=1,5 Hz), 3 proton c a nhóm methoxyl g n
5:5
FB4
30 g
CGFB01 (38)
4,3 mg
u ghép meta (
13
Ph
C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT cho
th y 16 tín hi u c a 16 carbon. Trong ó có b n carbon methine mang n i
ôi c a vòng benzene trong kho ng
duy nh t
C
C
93,1–122,0; m t carbon methoxyl
1
56,4 phù h p v i các tín hi u trên ph
H-NMR. Ngoài ra
còn có tám carbon t c p mang n i ôi và ba carbon carbonyl
5:5
C
178,7;
169,0 và 165,3.
FB4334
20 mg
t khác, ph HMBC cho th y trong 3 carbon carbonyl có 2 carbon
C:M 9:1
thu c 2 nhóm carboxyl, v y h p ch t 37 có th có 4 nhóm th (1
CGFB02 (24)
5 mg
FB43342
10 mg
FB43343
8 mg
CGFB03 (6)
7 mg
CGFB04 (7)
5 mg
methoxyl, 1 hydroxyl và 2 carboxyl) g n tr c ti p vào vòng benzene. V y
khung s
Ph HSQC cho phép xác
Cao EtOAc h t ô môi
(SE, 70 g)
SE2
2,64 g
SE3
3,14 g
C:M 10:0
SE41
0,056 g
SE42
0,323 g
SE43-45
0,607 g
2 c nh phù h p v i c c u khung
trên 2 vòng A và B (Hình 3.15).
2.8 Phân l p các h p ch t t cao n-BuOH trái ô môi
SE1
0,98 g
p mang n i ôi do ghép 3 vòng
xanthone. V i 2 c p proton ghép c p meta suy ra các nhóm th phân b
Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.
H:E 10:0
n h p ch t 37 có 13 carbon v i 1 nhóm carbonyl và 8 carbon t
và 3,91 t
nh các proton
ng ng g n tr c ti p v i các carbon
SE4
3,01 g
SE5
8,12 g
7:3
C:M 8:2
SE51
0,049 g
SE52
0,458 g
SE6
40,07 g
5:5
SE53-57
0,953 g
Ph HMBC cho th y proton
carbon carbonyl
C
H
C
119,3; 122,0; 93,1;
7,75 cùng có t
CGSE02
(19)
19 mg
ng;
2.9 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc h t ô môi
ng quan v i 2
169,0 và 165,3 (Hình 3.15) ch ng t
2 nhóm
carbonyl cùng g n vào m t vòng (cho là vòng A), vì v y hai nhóm
hydroxyl và methoxyl còn l i ph i g n
vòng B, proton
H
vòng
i di n (vòng B).
6,46 ghép c p meta v i proton
nhóm hydroxyl và methoxyl c ng ph i
-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th
- : T ng d n phân c c; giai
n cu i là k t tinh l i.
8,05; 7,75; 6,71; 6,46
97,7 và 56,4.
0:10
CGSE01
(35)
109 mg
Ghi chú:
H
nhóm hydroxyl ki m n i (g n C-9) v a có t
H
6,71 ch ng
v trí meta v i nhau. Proton
ng quan v i carbon methine
-11-
-141
trên ph
H-NMR; m t carbon carbonyl
methylene k nhóm carbonyl
oxygen
62,6 t
C
oxygen trên ph
ng
C
C
Cao acetone h t ô môi
(SA, 27 g)
174,5; m t carbon
34,1 và m t carbon methylene mang
E:M 10:0
ng phù h p v i các pronton methylene k
SA1
0,47 g
1
H-NMR; m t carbon methylene cách nhóm carbonyl b i
t carbon
C
0:10
SA2
2,67 g
24,8 và m t carbon methylene cách nhóm
hydroxymethylene b i m t carbon,
các proton methylene trên ph
25,7 c ng t
C
C:M 10:0
ng ng phù h p v i
SA21
0,051 g
1
H-NMR. Ngoài ra còn có tín hi u c a
nhi u nhóm methylene trong m ch bão hòa
kho ng
C
29,1-29,6 t
SA22
0,521 g
SA3
2,83 g
SA4
3,42 g
5:5
C:M 95:5
SA23-26
1,575 g
SA5
4,96 g
SA6-7
10,01 g
SA33
0,682 g
SA34-36
1,568 g
5:5
SA31-32
0,132 g
ng
CGSA01
(20)
302 mg
ng v i các proton methylene trong m ch carbon bão hòa xu t hi n trên
CGSA02
(15)
218 mg
1
ph
H-NMR.
Ghi chú:
So v i h p ch t (21) (d li u ph
2
m là
t
m c 3.2.1) thì h p ch t 22 khác
các d ki n trên có th xác
CH
nh h p ch t 22 là m t ester c a
glycerol v i m t dây axit-alcol bão hòa g m 25 carbon [s nhóm CH2 trên
ng;
2.10 Phân l p các h p ch t t cao acetone h t ô môi
dài m ch carbon bão hòa ng n h n 3 nhóm methylene và
u m ch thay vì là nhóm methyl thì là nhóm hydroxymethylene.
-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th
- : T ng d n
phân c c; giai
n cu i là k t tinh l i.
NG 3. K T QU VÀ BI N LU N
3.1 K T QU
t qu
NH TÍNH THÀNH PH N HÓA H C
nh tính cho th y trong cây ô môi hi n di n h u h t 9 nhóm h p
dây axit=(M-C3H7O3-CO-OH):14=(472-91-28-17):14=24] có c u trúc nh
ch t kh o sát: flavonoid, steroid, terpenoid, anthranoid, coumarine...
Hình
3.2 K T QU PHÂN L P, XÁC
3.10
và
tên
theo
IUPAC
là
hydroxypentacosanoate. C u trúc này
SciFinder t i
2,3-dihydroxypropyl
25-
c ki m tra b ng ph n m m
i h c Reims Champagne-Ardenne (Pháp) ngày 17-12-
NH C U TRÚC VÀ NH N DANH
Ph n này trình bày k t qu phân tích ph và bi n lu n chi ti t xác
trúc c a 4 h p ch t m i (d li u ph 38 h p ch t ã bi t chi m 15 trang).
2013 cho bi t ây là h p ch t t nhiên m i.
3.2.1
3.2.2.2 H p ch t 37 (casgrandxanthone A)
(22) 2,3-dihydroxypropyl-25-hydroxypentacosanoate:
Các
c tính v t lý và d li u ph (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u trúc có
liên h p, ph IR cho th y m t s dao
ng
C-O, C-C... H p ch t 37 còn cho ph n
c tr ng c a các n i O-H, C=O,
ng d
ng tính v i thu c th
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 331,04536 [M+H]+ (tính
+
toán lý thuy t: [C16H10O8+H] = 331,04539), phù h p v i công th c phân
Ph
1
m v t lý và d li u ph c a 4 h p ch t m i
25
D +10,5
-1
mp. 132-135 °C, [ ]
t màu tr ng,
(0,01M/CHCl3). FT-IR (KBr),
: 3422,
1
2848, 1735, 1467, 1178 cm . HRMS: m/z 473,42061 [C28H57O5]+. HNMR (CDCl3 & MeOD, 500MHz,
H
ppm, J Hz): 1,26-1,29 (40H; m; H-
(2H; m; H-2); 3,54-3,61 (2H; m; H-25); 3,63-3,66 (2H; m; H-3 ); 3,8613
3,89 (1H; m; H-2 ); 4,09-4,14 (2H; m; H-1 ). C-NMR (CDCl3 & MeOD,
125MHz,
b t bão hòa).
H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) cho tín hi u
c
4, 5..., 23); 1,54-1,57 (2H; m; H-24); 1,58-1,65 (2H; m; H-3); 2,33-2,36
FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.
C16H10O8 (330,04 vC, 12
nh c u
c tr ng c a 4
C
ppm): 24,83 (C-3); 25,70 (C-23); 29,08-29,60 (C-4, 5..., 22);
32,54 (C-24); 34,12 (C-2); 62,61 (C-25); 63,22 (C-3 ); 65,07 (C-1 ); 69,98
(C-2 ); 174,48 (C-1).
-13-
-12o
(37) Casgrandxanthone A: Hình kim màu vàng s m, mp. 330 C. UV
8); 154,0 (C-1); 139,4 (C-10); 135,3 (C-3); 123,3 (C-2); 119,7 (C-4);
(MeOH),
109,7 (C-9); 105,4 (C-7); 104,7 (C-5); 104,2 (C-1'); 102,3 (C-1"); 78,1 (C-
max:
377, 402 nm. FT-IR (KBr), : 3391, 2919, 1656, 1490,
-1
+
1
1157 cm . HRMS: m/z 331,04536 [C16H11O8] . H-NMR (DMSO-d6,
3'); 77,5 (C-5'); 74,9 (C-2'); 74,1 (C-4"); 72,4 (C-3"); 72,1 (C-2"); 71,3
500MHz,
(C-4'); 69,9 (C-5"); 67,7 (C-6'); 32,6 (C-12); 20,3 (C-13); 17,9 (C-6").
H
ppm, J Hz): 7,75 (1H; d; 1,5; H-2); 8,05 (1H; d; 1,5; H-4);
6,71 (1H; d; 2,0; H-5); 6,46 (1H; d; 2,0; H-7); 3,91 (3H, s, H-6 ); 12,29
(1H, s, 1 -OH).
13
C-NMR (DMSO-d6, 125MHz,
C
ppm): 135,4 (C-1);
3.2.2 Bi n lu n chi ti t xác
nh c u trúc các h p ch t m i
3.2.2.1 H p ch t 22 (2,3-dihydroxypropyl-25-hydroxypentacosanoate)
122,0 (C-2); 137,0 (C-3); 119,3 (C-4); 155,3 (C-4a); 157,2 (C-4b); 93,1
c tính v t lý và d li u ph (m c 3.2.1). Ph IR cho th y m t s
(C-5); 167,1 (C-6); 97,7 (C-7); 162,4 (C-8); 103,6 (C-8a); 178,7 (C-9);
dao
118,8 (C-9a); 169,0 (C-1 ); 165,3 (C-3 ); 56,4 (C-6 ).
UV ch ng t c u trúc không có h liên h p, âm tính v i thu c th
(40) Casgranone B: Hình kim màu vàng, mp. 229-230 °C. UV (MeOH),
FeCl3/EtOH ch ng t không thu c nhóm phenolic.
max:
226, 258, 261, 302 nm. FT-IR (KBr), : 3379, 2923, 1628, 1461,
1276 cm-1. HR-MS: m/z 481,1245 [C22H25O12]+.
500MHz,
H
1
H-NMR (MeOD,
ppm, J Hz): 7,72 (1H; d; 1,0; H-4); 7,51 (1H; d; 1,0; H-2);
7,25 (1H; t; 8,0; H-6); 6,32 (2H; d; 8,0; H-5; H-7); 4,69 (1H; s; H-11a,b);
ng
c tr ng c a các n i O-H, C-O, C-C; không hi n v t d
i èn
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 473,42061 [M+H]+ (tính
toán lý thuy t: [C28H56O5+H]+ = 473,42060), t
ng ng v i công th c
phân t C28H56O5 (472,41 vC).
1
Các ph
H-NMR (CDCl3-CD3OD, 500 MHz) k t h p v i HSQC,
3,73 (1H; s; H-12); 4,92 (1H; d; 7,5; H-1'); 3,87 (1H; m; H-6'a); 3,67 (1H;
HMBC cho th y h p ch t 22 có các tín hi u c a 4 proton oxymethylene
m; H-6'b); 3,42 (1H; m; H-5'); 3,40 (1H; m; H-3'); 3,33 (1H; m; H-4'); 3,26
trong kho ng
13
(1H; m; H-2'). C-NMR (MeOD, 125MHz,
C
ppm): 202,7 (C-9); 167,6
3,86–3,89
H
3,63–4,14; m t tín hi u proton oxymethine
kho ng
H
c tr ng cho nhóm glyceryl; m t tín hi u c a 2 proton
(C-10); 163,2 (C-8; C-5a); 155,0 (C-1); 144,7 (C-3); 137,7 (C-6); 136,0
methylene k nhóm carbonyl
(C-1a); 129,4 (C-4a); 120,0 (C-2); 122,8 (C-4); 112,9 (C-8a); 108,2 (C-5;
proton methylene k oxygen
C-7); 64,4 (C-11); 52,6 (C-12); 103,2 (C-1'); 78,2 (C-5'); 77,9 (C-3'); 74,9
methylene cách nhóm carbonyl và oxygen b i m t carbon,
(C-2'); 71,1 (C-4'); 62,6 (C-6').
1,54–1,65. Ngoài ra còn có các tín hi u proton c a nhi u nhóm methylene
(41) Casgranone C:
t màu nâu, mp. 165-166 °C. UV (MeOH),
max:
trong m ch carbon bão hòa
211, 325 nm. FT-IR (KBr), : 3442, 3083, 2920, 1703, 1630 cm . HR1
H-NMR (MeOD, 500MHz,
H
ppm, J Hz): 6,94 (1H; d; 2,0; H-5); 6,93 (1H; d; 2,0; H-4); 6,73 (1H; d;
3.86 - 3.89
2'
HO
63.2
70.0
3'
kho ng
65.1
O
2.34
2
174.5
1
H
H
2,28–2,36; m t tín hi u c a 2
3,54–3,61 và các tín hi u proton
3.58 - 3.66
3
1.64
4.09 - 4.14
29.0
1.29
22
1.26
29.1
5
1.26
29.6
15
29.6
21
1.29
29.6
1.55
24
25.7
H
62.6
OH
25
3.50
O
Hình 3.10 T
Ph
ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 22
13
C-NMR (CDCl3-CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT và
HSQC, HMBC cho th y: m t carbon oxymethine duy nh t
NMR (MeOD, 125MHz,
hai carbon oxymethylene
ppm): 208,3 (C-11); 158,2 (C-6); 157,4 (C-
32.5
23
1.43
groups); 2,61 (1H; s; H-12); 2,30 (1H; s; H-13); 1,23 (1H; d; H-6"). 13CC
kho ng
1,26–1,29.
1.29
4
24.8
34.2
1'
2,0; H-7); 5,08 (1H; d; 8,0; H-1'); 4,77 (1H; d; 1,5; H-1"); 4,10 (1H; dd;
1,5; 11,0; H-6'a); 3,95 (1H; dd; 1,5; 3,5; H-2"); 3,36-3,75 (8H; m; 8 CH
kho ng
H
OH
-1
MS: m/z 563,1747 [C25H32O13Na]+.
kho ng
C
C
70,0 và
65,1 và 63,2 phù h p v i nhóm glyceryl
- Xem thêm -
.PDF 
14 
640 
83 
