Tài liệu Tác dụng chống oxy hóa và bảo vệ gan của nước chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men trên gan tổn thương do ethanol 1

Bài tiểu luận Hóa sinh nhóm 4 ĐỀ TÀI: Tác dụng chống oxy hóa và bảo vệ gan của nước chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men trên gan tổn thương do Ethanol Danh sách thành viên stt 1 2 3 4 5 6 7 8 Họ và tên Nguyễn Thảo Lan Phạm Lê Mai Tạ Xuân Hiệp Trương Minh Hiếu Phạm Thị Phương Nguyễn Thị Thùy Trang Hoàng Văn Tú Nguyễn Thị Hồng Nhung MSV 646112 645924 646279 646287 646057 646012 646028 646023 Bài dịch: Corporation Publishing Hindawi BioMed Research International Volume 2013, Bài báo ID 693613, 9 trang http:/dx.doL.org/10.1155/2013/693613 Bài báo nghiên cứu Tác dụng chống oxy hóa và bảo vệ gan của nước chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men trên gan tổn thương do Ethanol Norlaily Mohd Ali, 1 Hamidah Mohd Yusof, 1 Kamariah Long, 2 Swee Keong Yeap, 3 Wan Yong Ho, 1 Boon Kee Beh, 4 Soo Peng Koh, 2 Mohd Puad Abdullah, và 1 Noorjahan Banu Alitheen 1 Khoa Sinh học Tế bào và Phân tử, Khoa Công nghệ Sinh học và Khoa học Phân tử Sinh học, Đại học Putra Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia 2 Phòng Công nghệ Sinh học Quy trình Sinh học, Viện Phát triển Nghiên cứu Nông nghiệp Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia 3 Viện Khoa học Sinh học, Đại học Putra Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia 4 Khoa Công nghệ Xử lý Sinh học, Khoa Công nghệ Sinh học và Khoa học Phân tử Sinh học, Đại học Putra Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia Thư từ cần được gửi tới Noorjahan Banu Alitheen; [email protected] Nhận ngày 30 tháng 8 năm 2012; Sửa đổi ngày 25 tháng 10 năm 2012; Được chấp nhận ngày 26 tháng 10 năm 2012 Biên tập viên học thuật: Andre Van Wijnen Bản quyền © 2013 Norlaily Mohd Ali et al. Đây là một bài báo truy cập mở được phân phối theo giấy phép ghi công Creative Commons, cho phép sử dụng, phân phối và sao chép không hạn chế trong bất kỳ phương tiện nào, miễn là tác phẩm gốc được trích dẫn chính xác. Đậu xanh là một chất bảo vệ gan trong thực phẩm chức năng. Quá trình lên men và nảy mầm được công nhận là có tác dụng nâng cao giá trị dinh dưỡng, đặc biệt là nồng độ của các hợp chất hoạt động như axit amin và GABA của các loại thực phẩm khác nhau.Trong nghiên cứu này, tác dụng chống oxy hóa và bảo vệ gan của đậu xanh đông khô và axit amin, GABAchiết xuất từ nước đậu xanh lên men và nảy mầm được so sánh. Superoxide dismutase gan (SOD), malondialdehyde (MDA), khả năng chống oxy hóa khử sắt (FRAP), mức oxit nitric (NO) và chất sinh hóa huyết thanh như aspartate transaminase (AST), alanin transaminase (ALT), triglycerid (TG), và những thay đổi về cholesterol và mô bệnh học đã được kiểm tra để tìm chất chống oxy hóa và tác dụng bảo vệ gan của các phương pháp điều trị này. Giá đậu xanh nảy mầm và lên men đã ghi nhận mức tăng 27,9 và 7,3 lần GABA và 8,7 lần cải thiện axit amin tương ứng 13,2 lần so với đậu xanh bình thường. Ngoài ra, cải thiện mức độ chống oxy hóa, dấu hiệu huyết thanh và mức NO liên quan đến đánh giá mô bệnh học tốt hơn chỉ ra rằng những chất chiết xuất này có thể thúc đẩy phục hồi hiệu quả từ tổn thương tế bào gan. Kết quả cho thấy rằng chiết xuất nước đậu xanh đông khô, nảy mầm và lên men được làm giàu với các axit amin và GABA có tác dụng bảo vệ gan tốt hơn so với đậu xanh bình thường. I. Giới thiệu Gan là cơ quan viêm cơ quan trọng, tham gia vào quá trình chuyển hóa, lưu trữ và bài tiết các chất chuyển hóa. Đây là một số lượng đáng kể các độc tố đã được báo cáo gây tổn thương gan như ethanol, paracetamol, và cacbon tetraclorua [1– 5]. Mô hình tổn thương gan của chuột gây ra bởi các độc tố gan khác nhau cho thấy xu hướng tương tự nhưng với các thay đổi nhỏ như tăng tính thấm màng, quá trình peroxy hóa lipid và chết tế bào có thể so sánh với sự phát triển của bệnh gan mãn tính ở con người. Khi được kích thích từ các độc tố gan khác nhau, các tế bào Kupffer giải phóng các chất trung gian tiền viêm như NO và Interferon-gamma (IFN-��) cuối cùng sẽ cho kết quả tích tụ các loại nitơ phản ứng (ROS). ROS đã được chứng minh là gây ra sự peroxy hóa lipid và màng suy thoái sẽ tạo ra tổn thương và viêm gan [1, 3, 5, 6]. Các nguồn tự nhiên của chất chống oxy hóa như trà xanh đã được báo cáo là làm tăng mức độ SOD và FRAP trong tế bào chất của gan chuột giúp phục hồi ảnh hưởng do chấn thương trở lại gần như bình thường [7]. Polyphenol, flavonoid và anthocyanins đã được cho là có hoạt tính chống oxy hóa mạnh, góp phần vào tác dụng bảo vệ chống lại gan thương tích ở chuột [4, 7]. Đậu xanh (Vignaradiata), được trồng chủ yếu ở khu vực Đông Á và Nam Á chứa nhiều nguồn protein, axit amin thiết yếu, khoáng chất, vitamin và chất xơ. Nó đã nổi tiếng là có các giá trị đa dinh dưỡng cũng như dược tính. Các nghiên cứu trước đó đã chứng minh rằng đậu xanh có thể hoạt động như một chất chống oxy hóa [2, 8],bảo vệ gan [9] và tác nhân chống đái tháo đường do có chỉ số đường huyết thấp [10, 11]. Gần đây, nó được báo cáo rằng ethanolic chiết xuất đậu xanh thể hiện phản ứng chống viêm bằng cách giảm các cytokine tiền viêm trong đại thực bào chuột [5, 12]. Nảy mầm và lên men đã được kết hợp tốt với lượng chất chống oxy hóa cao và GABA [13–16]. GABA (axit ��-amino butyric) là một trong các axit amin nonprotein hoạt động như một chất ức chế tế bào thần kinh trong động vật có vú, có thể được chiết xuất từ thực vật. Nhiều các nghiên cứu đã công bố rằng vai trò của GABA như một chất chống tăng huyết áp, chống ung thư và chống viêm và các lợi ích sức khỏe khác của nó [17– 19]. Các khía cạnh này đã kích thích sự quan tâm đến việc tạo ra các sản phẩm tự nhiên được làm giàu GABA. Sản phẩm đậu nành lên men, GABA-Tempeh, là một loại thực phẩm truyền thống có chứa nhiều oligopeptit và không có axit amin (chủ yếu là GABA) góp phần làm giảm mức độ cholesterol trong huyết tương [18]. Tác dụng của nó có thể tương quan với nhau với chức năng gan là chuyển hóa lipid trong cơ thể. Trước đó, bằng cách trải qua quá trình nảy mầm và lên men, chất chiết xuất từ nước đậu xanh đông khô có thể góp phần trong tác dụng bảo vệ gan và các lợi ích sức khỏe khác. Wu và cộng sự [9] là những người đầu tiên báo cáo về tác dụng bảo vệ gan của đậu xanh. Nghiên cứu của họ đã so sánh mô học và thay đổi sinh hóa của tổn thương gan do acetaminophen và các đặc tính cải tiến của các loại đậu khác nhau của Đài Loan chẳng hạn như đậu adzuki, đậu đen, đậu gạo và đậu xanh. Chiết xuất nước đậu xanh được xác định là thể hiện tốt nhất tác dụng bảo vệ gan giữa các loại đậu chống lại các độc tố gây thương tích, acetaminophen. Cho đến nay, không có thử nghiệm in vivo nào được thực hiện để đánh giá tác dụng của các chất chiết xuất từ nước đậu xanh được ủ đông khô và lên men trên mô hình động vật. Mục đích của nghiên cứu này là nhằm so sánh hàm lượng các enzym chống oxy hóa in vivo và tác dụng bảo vệ gan của đậu xanh đông khô binh thường, các chất được chiết xuất từ nước đậu xanh được làm giàu chất dinh dưỡng và lên men trên mô hình chuột bị tổn thương gan do ethanol gây ra. Nghiên cứu này cũng nhằm mục đích thiết lập mối tương quan giữa tác động của quá trình lên men và nảy mầm đối với các axit amin và mức GABA của đậu xanh với đặc tính bảo vệ gan của các chất chiết xuất. II. Nguyên liệu và phương pháp 2.1 Nguyên liệu : Hypoxanthine, xanthine oxidase, superoxide dismutase, thuốc thử FolinCiocalteu, nhôm clorua, natri nitrat, axit ascorbic và axit gallic đã được mua từ Sigma-Aldrich (Mỹ). Tất cả các dung môi được sử dụng đều là thuốc thử phân tích hoặc loại HPLC. Thuốc thử Griess đến từ Invitrogen (Mỹ). Chất cấy chủng Rhizopus 5351 được lấy từ trung tâm thu thập nuôi cấy MARDI (Viện nghiên cứu và phát triển Nông nghiệp Malaysia). Chiết xuất cây kế sữa chứa 80% silybin là lấy từ công ty dược phẩm Lipa của Úc. 2.2 Động vật Chuột Balb/c đực từ 8–10 tuần tuổi nặng 20–25 g được duy trì trong điều kiện tiêu chuẩn với nhiệt độ (22 ± 5⁰C) và độ ẩm trong chuồng gia súc với 12 giờ của chu kỳ sáng / tối. Những con vật này được cung cấp thức ăn và nước uống tùy thích. Các thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt và được sự chấp thuận của Ủy ban chăm sóc và sử dụng động vật, Đại học Putra Malaysia 2.3 Nguyên liệu thực vật Hạt đậu xanh được mua từ cửa hàng địa phương ở Selangor. Hạt đậu xanh đã được phép trải qua quá trình lên men ở trạng thái rắn dựa trên phương pháp trước đây của chúng tôi [20] và quá trình nảy mầm trước đó để chiết xuất. Đối với đậu xanh lên men [20], khoảng 1000 g hạt đậu xanh tách vỏ ngâm trong nước lạnh ở nhiệt độ phòng trong 18 giờ. Đậu xanh ngâm nước rửa sạch kỹ lưỡng và hấp trong 40 phút. Sau đó, những hạt đã hấp này được làm lạnh đến nhiệt độ phòng và được trộn với chất cấy chủng Rhizopus 5351. Từ các nghiên cứu sơ bộ của chúng tôi trước đây (dữ liệu không được hiển thị), những hạt đậu xanh đã được sàng lọc có sự khác nhau với các chủng Rhizopus khác nhau (5346,5347, 5351, 5375, 5376, 5377, 5408 và 5410). Các kết quả cũng tiết lộ rằng chủng Rhizopus 5351 cho năng suất cao nhất về tổng số axit amin và hàm lượng GABA trong đậu xanh lên men sau 48 giờ ủ ở 30⁰C. Sau đó, tác dụng bảo vệ gan của đậu xanh lên men được cấy với chủng 5351 đã được đánh giá. Những hạt đã được cấy giống này sau đó được đóng gói vào nhựa có đục lỗ và ủ trong 48 giờ ở 30°C. Cuối cùng, tất cả hạt đậu xanh lên men được sấy khô và nghiền thành bột trước khi chiết xuất nước. Mặt khác, hạt đậu xanh nảy mầm được chuẩn bị bằng cách cho hạt đậu xanh nảy mầm bên trong thùng chừa Anaerocukt A được cung cấp khí CO2 trong thời gian lên tới 72h. Hạt nảy mầm sau đó được để khô cho đến khi đạt được độ ẩm không đổi và nghiền thành bột trước khi chiết xuất nước. Để kiểm soát, hạt đậu xanh được nghiền trực tiếp thành bột mà không cần lên men hoặc nảy mầm trước. Bột nghiền mịn sau đó được chiết xuất bằng cách sử dụng nước khử ion (tỷ lệ 1: 20) ở 25⁰C trong 30 phút và được đặt trong tủ ấm lắc ở tốc độ 300 vòng /phút trong 30 phút ở nhiệt độ phòng . Hỗn hợp sau đó được ly tâm trong 5 phút ở tốc độ 10.000 vòng / phút và phần nổi phía trên được thu thập. Chất nổi trên được bơm thêm vào để đông khô ở nhiệt độ vận hành -50⁰C (năng suất 25%, w / w). Bột đông khô được bảo quản ở 4°C. Các thí nghiệm được thực hiện theo [ 20–22] với các thay đổi nhỏ. 2.3.1 Xác định axit amin và GABA Bột đông khô được hòa tan trong nước cất và được lấp đầy qua bộ lọc ống tiêm 0,2 �m trước khi phân tích UPLC. Quá trình tạo dẫn xuất được thực hiện bằng cách trộn 70 μL dung dịch đệm AccQ Tag Ultra borate với 10 μL dung dịch chiết xuất đã lọc, tiếp theo là thêm 20 μL thuốc thử AccQ Fluor bằng ống Pcr 1.5ml. Tất cả các phân tích được thực hiện trên hệ thống Waters Acquity UPLC, bao gồm bộ quản lý dung môi nhị phân, bộ quản lý mẫu được trang bị vòng lặp mẫu 2 Μl và bộ dò UV-PDA ở bước sóng 260 nm. Dữ liệu được phân tích bằng phần mềm Waters Empower 2. Acquity UPLC AccQ-Tag Ultra Column (kích thước hạt 2,1 mm × 100 mm × 1,7 μm) được sử dụng để xác định biến dạng GABA và axit amin. Pha động được sử dụng là chất để chiết AccQ-Tag Ultra A cho pha động A và chất để chiết AccQ-Tag Ultra B cho pha động B. Điều kiện gradient là: 0–0,54 phút, 0–0,1% B; 0,54–5,74 phút, 0,1–9,1% B; 5,74–7,74 phút, 9,1–21,2% B; 7,74–8,8 phút, 21,2–59,6% B; 8,8–11 phút, 59,6–0,1% B, và cuối cùng, điều chỉnh lại cột với 0,1% B với dòng đẳng cấp trong 2,1 phút sau khi rửa cột với 59,6% B trong 0,30 phút. Tốc độ dòng được đặt ở 0,7 mL / phút và thể tích tiêm cho tất cả các mẫu chất chuẩn là 1,0 μL. Nhiệt độ cột được đặt ở 55°C theo [20,23]. 2.4. Trong Vivo Tác dụng bảo vệ gan-Ethanol Gây ra độc tính trên gan ở Chuột. Tổng số 72 con chuột Balb / c được phân phối ngẫu nhiên thành 8 nhóm (n = 8). III. Kết quả 3.1. GABA và Hàm lượng axit amin: Trước đây chúng tôi đã báo cáo rằng đậu xanh lên men có hàm lượng GABA và axit amin cao gấp 7,6 lần và 13,2 lần so với bột đậu xanh khô thông thường [20]. Tương tự, đậu xanh nảy mầm cũng cho thấy nồng độ GABA và axit amin tăng 27,9 lần và 8,7 lần lên 0,502 ± 0,035g / 100g và 2,092 ± 0,117g / 100g bột khô, tương ứng. 3.2. Hiệu ứng bảo vệ gan trong Vivo 3.2.1. Ảnh hưởng của chất chiết xuất từ nước trên các dấu hiệu sinh học chức năng gan: ALT và AST là hai dấu hiệu sinh hóa thường được sử dụng để đánh giá giai đoạn đầu của tổn thương gan. Bảng 1 cho thấy ethanol đã làm tăng đáng kể mức ALT và AST huyết thanh ở gan chuột so với nhóm bình thường cho thấy có sự cố tổn thương gan. Mức ALT huyết thanh đã được hạ thấp thành công ở tất cả các nhóm sau điều trị với liều cao chiết xuất đậu xanh, hạt nảy mầm và lên men (1000 mg / kg). Ngược lại, mức ALT huyết thanh ở tất cả các nhóm được xử lý với liều lượng thấp của chiết xuất đậu xanh (200 mg / kg) tiếp tục tăng, cho thấy rằng các chức năng của gan đã bị tổn hại. Trong tất cả các nhóm được xử lý chiết xuất của cả hai nồng độ, các dấu hiệu huyết thanh của AST đều giảm xuống thấp hơn so với nhóm giảm độc lực với ethanol. Xử lý bằng đậu xanh lên men ở liều cao (1000 mg / kg) cho thấy tỷ lệ ức chế cao nhất của ALT huyết thanh (63,73%) và AST (69,84%), tiếp theo là đậu xanh nảy mầm liều cao (1000 mg / kg), 45,25% (ALT) và 47,75% (AST), khi so sánh với nhóm đối chứng với ethanol. Kết quả trên cho thấy đậu xanh lên men ở liều cao (1000 mg / kg) có khả năng giữ lại ALT và AST huyết thanh gần nhất với mức bình thường và có hiệu suất tốt hơn so với thuốc tiêu chuẩn là silybin. 3.2.2. Ảnh hưởng của chất chiết xuất từ nước lên huyết thanh TG và Cholesterol: Một dấu hiệu khác để xác nhận tổn thương gan cấp tính do rượu được chỉ định là nồng độ TG và cholesterol trong huyết thanh tăng. Như thể hiện trong Bảng 1, điều trị bằng chiết xuất làm giảm mức tăng TG và cholesterol với mức giảm đáng kể trong đậu xanh lên men liều cao (1000 mg / kg) với 38,4% và 23,42%, tương ứng. 3.3. Ảnh hưởng của các chất chiết xuất từ nước đến mức độ SOD, MDA, FRAP và NO trong dịch treo mô đồng thể ở gan. Ảnh hưởng của việc uống chiết xuất từ nước đậu xanh, đậu xanh nảy mầm và đậu xanh lên men đối với chất chống oxy hóa gan được thể hiện trong Bảng 2. Sau khi say rượu ethanol, sự suy giảm mức độ superoxide dismutase (SOD) và giảm sức mạnh chống oxy hóa của sắt (FRAP) được quan sát thấy ở nhóm tổn thương gan (do ethanol gây ra) khi so sánh với nhóm bình thường. Tuy nhiên, mức độ SOD tăng trở lại bình thường ở tất cả những con chuột được xử lý chiết xuất với liều lượng thấp (200 mg / kg / ngày) và cao (1000 mg / kg / ngày) đậu xanh, hạt nảy mầm và lên men. Mặt khác, nồng độ MDA và NO tăng rõ rệt ở gan giảm độc lực với ethanol, dấu hiệu của quá trình peroxy hóa lipid và phản ứng viêm. Sự giảm đáng kể trong sản xuất MDA và NO được nhận thấy ở tất cả các nhóm được xử lý bằng chiết xuất nước. Đậu xanh lên men có thể làm giảm mức MDA 3,6 lần từ 7,17 ± 0,17 xuống 2,00 ± 0,23 (nmol / g protein) và mức NO 1,6 lần từ 14,72 ± 0,75 xuống 9,03 ± 0,06 (μmol / mg protein). Trong khi đó, nó cũng làm tăng mức độ enzym SOD và hoạt tính FRAP lên 2,3 lần và 2,2 lần, về cơ bản góp phần vào tác dụng bảo vệ gan chống lại các gốc tự do. Liều cao nhất của đậu xanh lên men (1000 mg / kg / ngày) được cho là có thể so sánh cao nhất với các nhóm thuốc thông thường và tiêu chuẩn. Bảng 1: Ảnh hưởng của chất chiết xuất từ đậu xanh trên huyết thanh ALT, AST, TG và cholesterol trong ngộ độc gan cấp do rượu ở chuột. Giá trị là trung bình ± SEM của 8 con vật trong một nhóm và cho thấy khác biệt đáng kể so với 50% EtOH (Giả dược) (* P <5) của ANOVA và theo sau là thử nghiệm nhiều phạm vi của Duncan. Bảng 2: Ảnh hưởng của chất chiết xuất từ đậu xanh lên mức SOD, MDA, FRAP và NO trong dịch treo mô đồng thể ở gan với ngộ độc gan cấp do rượu ở chuột. Giá trị là trung bình ± SEM của 8 con vật trong một nhóm và khác biệt đáng kể so với 50% EtOH (giả dược) (* P <5) của ANOVA và theo sau là thử nghiệm nhiều phạm vi của Duncan. 3.4. Đánh giá mô bệnh học. Đánh giá mô bệnh học của gan được thực hiện cho tất cả các nhóm. Hình 1 (a) cho thấy không có bất thường bệnh lý nào được quan sát thấy trong gan của chuột bình thường và do đó cho thấy không có các thay đổi về mạch máu hoặc hoại tử. Hình 1 (b) cho thấy rằng các thay đổi hoại tử nghiêm trọng do ethanol gây ra và những thay đổi đáng kể trong phần gan như bóng nước, nhiễm mỡ vi hạt, tăng giãn không gian hình sin (SS) và tĩnh mạch trung tâm, và các tế bào lympho thâm nhập vào các hình sin ở nhóm không được điều trị bằng ethanol. đến nhóm bình thường. Đặc điểm nổi bật được quan sát thấy ở gan do ethanol gây ra là trong các giai đoạn khác nhau của sự ngưng tụ tế bào chất, nhiễm mỡ vi hạt và hoại tử tế bào gan cho thấy giai đoạn đầu của tổn thương gan. Mặt khác, gan của chuột ở tất cả các nhóm được điều trị bằng chiết xuất nước cho thấy sự phục hồi đáng chú ý từ tổn thương gan do ethanol gây ra khi so sánh với nhóm không được điều trị bằng ethanol ít bị nhiễm mỡ vi hạt và hoại tử tế bào gan hơn. Các thay đổi hoại tử vừa phải đã được nhận thấy ở tất cả các nhóm được điều trị bằng chiết xuất đậu xanh với liều lượng thấp (Hình 1 (d), 1 (f) và 1 (h)). Liều cao đối với các nhóm được xử lý bằng chất chiết xuất từ nước đậu xanh, nảy mầm và lên men cho thấy các thay đổi về viêm và hoại tử nhẹ, với mức độ nghiêm trọng ít hơn so với những thay đổi được quan sát thấy sau khi sử dụng ethanol (Hình 1 (e), 1 (g) và 1 (i)). Giảm mức độ giãn tĩnh mạch hình sin và tĩnh mạch trung tâm, bóng nước, và hoại tử tế bào gan được nhận thấy đặc biệt ở đậu xanh nảy mầm và lên men liều cao (1000 mg / kg) (Hình 1 (g)). IV. Thảo Luận Mô hình 1: Hình ảnh chụp vi mô (40 × 10) của phần gan được lấy từ chuột. Nhóm bình thường (a) nhận được nước muối như một nhóm đối chứng bình thường, cho thấy một cấu trúc bình thường của tĩnh mạch trung tâm được bao quanh bởi các tế bào gan, (b) nhận được nước muối được tạo ra với 50% etanol như một nhóm đối chứng bằng etanol, cho thấy một nhiễm mỡ và hoại tử tế bào gan; (c) nhận được Silybin (50 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được cảm ứng với 50% etanol; (d) đã nhận đậu xanh (200 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được cảm ứng với 50% etanol; (e) đậu xanh đã nhận (1000 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được cảm ứng với 50% etanol; (f) nhận được đậu xanh nảy mầm (200 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được tạo ra với 50% etanol; (g) nhận được nảy mầm đậu xanh (1000 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được cảm ứng với 50% etanol; (h) nhận đậu xanh lên men (200 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi được cảm ứng với 50% etanol; (i) nhận được đậu xanh lên men (1000 mg / kg trọng lượng cơ thể) sau khi cảm ứng với 50% etanol. Tác dụng bảo vệ gan đáng kể được thấy trong đậu xanh được xử lý bằng chiết xuất, đặc biệt là đã nảy mầm và lên men. Mũi tên chỉ ra trạng thái nhiễm mỡ vi hạt trong chấn thương gan, chủ yếu gây ra bởi nhóm ethanol. Vòng tròn biểu thị tế bào gan bị hoại tử. Tĩnh mạch trung tâm (CV) Ethanol đã được báo cáo là một chất góp phần quan trọng gây ra tổn thương gan và thận ở người và động vật khi tiếp xúc trong một thời gian nhất định [ 1, 30]. Sự chuyển hóa Ethanol có thể gây ra sự phân hủy protein, lipit và DNA do sự biến đổi của các gốc tự do. Kết quả của nghiên cứu này hỗ trợ cho công việc của các báo cáo đã xuất bản trước đây bằng cách sử dụng chiết xuất tự nhiên để điều trị trên chuột bị bệnh do ethanol gây ra, như một mô hình cho bệnh gan cấp tính. Các tế bào gan bị giảm chức năng do ethanol bao gồm: viêm nhiễm, apoptosis và hoại tử kể cả xơ gan. Ngoài ra, tiếp xúc kéo dài với ethanol đã được chứng minh là làm tăng mức TNF-a, cytokine tiền viêm, do đó có thể kích hoạt các chemokine gây viêm khác, rõ ràng là NO. Giảm khả năng bảo vệ chống oxy hóa và tăng các dấu hiệu huyết thanh như: AST, ALT, TG và cholesterol cũng được quan sát thấy [4, 33]. Hơn nữa, nhiều nghiên cứu đã chỉ ra mối liên hệ cửa chất chống oxy hóa trong việc chống lại tổn thương gan do oxy hóa[5,34,35]. Để đánh giá các đặc tính bảo vệ gan của chất chiết xuất, nghiên cứu in vivo được thực hiện để đo các dấu hiệu huyết thanh và sự hiện diện chemokine trong đó. Theo Koch và cộng sự[ 33], dị hóa ethanol sẽ dẫn đến thặng dư NADH và acetyl-CoA, do đó gây ra sự sinh lipogenesis của cholesterol và TG và cũng như rò rỉ các enzym tế bào và huyết tương được gắn với ALT, AST huyết thanh. Những thứ này sẽ góp phần làm tổn thương gan. Do đó bằng cách khôi phục mức độ ALT, AST, cholesterol và TG trong huyết thanh trở lại bình thường, một lượng cao đậu xanh lên men đã chứng nhận ít nhất một phần tác dụng bảo vệ gan của nó. Hơn nữa trong nghiên cứu này, tác dụng bảo vệ gan của đậu xanh được so sánh với các chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men. Mức độ giảm ALT, AST, cholesterol và hàm lượng TG trong huyết thanh cao hơn được quan sát ở nhóm đậu xanh nảy mầm và lên men so với nhóm đậu xanh. Tuy nhiên, các chất từ đậu xanh cũng góp phần làm giảm nhẹ các dấu ấn sinh học huyết thanh đó. Kết quả cuả chúng tôi phù hợp với các nghiên cứu trước đây được thực hiện trên các sản phẩm thực thẩm lên men trong đó có các dấu hiệu huyết thanh gây ra đã được khôi phục đáng kể và trở lại bình thường thông qua các nghiên cứu in vivo [36] và invitro[19]. Các đặc tính chống oxy hóa của chất chiết xuất đã được kiểm tra trong mô gan chuột thông qua xét nghiệm MDA, SOD, FRAR và NO. Lượng MDA tăng lên trong gan do ethanol gây ra cho thấy mức độ tăng cao của quá trình peroxy hóa lipid, có thể dẫn đến tổn thương gan. Ngược lại, mức SOD và FRAP trong nhóm sử dụng ethanol đã giảm. sự suy giảm cả 2 hoạt động trong mô gan của nhóm sử dụng ethanol phần lớn là do sự suy giảm của các enzyme chống oxy hóa bảo vệ tế bào chống lại các loại axygen phản ứng [31]. Mặt khác sự gia tăng mức SOD, FRAP và giảm sự hình thành MDA trong các nhóm được xử lí chiết xuất len men và nảy mầm như mong đợi. tổng hàm lượng phenol cao và hoạt tính chống oxy hóa mạnh đã được khẳng định trong đậu xanh lên men [37,38] và nảy mầm [14,39]. Đây có thể là lí do giải thích cho sự gia tăng các hoạt động SOD và FRAP trong đậu xanh nảy mầm và lên mem ở liều lượng cao so với đậu xanh, do đó làm giảm mức MDA. Ngoài ra, nó đã được báo cáo rằng chiết xuất đậu xanh có chứa chất chống oxy hóa dễ bay hơi có thể ức chế sự hình thành mal-onaldehyde trong huyết tương[40]. NO là chất trung gian gây viêm và chất oxy hóa có hoạt tính cao được tạo ra bởi INOS, được giải phóng bởi các tế bào kupffer khi tiếp xúc với độc tố gan[5,41]. Trong tất cả các nhóm được xử lí chiết xuất, mức NO được hoàn nguyên về mức bình thường. chất chiết xuất từ đậu xanh lên men liều cao là những chất chiết xuất hiệu quả nhất để phục hồi sự gia tăng của mức NO sau khi cảm ứng với ethanol sau đó là chất chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm. do đó bằng cách ngăn chặn sản xuất NO trong gan, đậu nảy mầm và len men đã mô tả các đặc tính tiềm năng của chúng như một tác nhân bảo vệ gan. Sự biện minh hợp lí cho tác dụng bảo vệ và chống oxy hóa của đạu xanh nảy mầm và lên men ở liều cao có thể là do sự hiện diện của các hợp chất hoạt tính sinh học flavonoid và axit phenolic, được phát hiện nhiều đặc biệt trong các sản phẩm lên men và nảy mầm[14,42]. Bên cạnh đó , nhiều nghiên cứu đã báo cáo sự gia tăng hàm lượng GABA và axit amin trong cây họ đậu thương mại sau khi trải qua quá trình nảy mầm[43,46] và lên men[21,47]. Sự gia tăng các axit amin và GABA trong chiết xuất đậu xanh nảy mầm và len của chúng tôi có thể được bổ sung vào các đặc tính bảo vệ gan vì các axit amin GABA được biết là có tác dụng bảo vệ gan thông qua cơ chế duy trì mức độ polyamine nội bào của etanol và tổn thương gan do tiếp xúc với CCL hiệu ứng[48,49]. Trong nghiên cứu này, đánh giá mô học đã được thực hiện để hỗ trợ các cấu hình hóa sinh. Những thay bệnh lí được quan sát thấy ở gan được xử lí bằng ethanol thông qua nhuộm H&E có liên quan đến kết quả thu được. việc sử dụng ethanol trên mô hình động vật chuột cho thấy mức độ tăng cao của các dấu ấn sinh học chức năng gan ALT, AST, TG và nồng độ cholesterol được phát hiện cùng với sự giảm hoạt động chống oxy hóa và thay đổi mô bệnh học hoại tử nghiêm trọng. tuy nhiên tác dụng bảo vệ gan có thể có của chất chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men đã được quan sát thấy khi gan giảm độc được điều trị bằng chất chiết xuất . nghiên cứu trước đây đã báo cáo các đặc tính bảo vệ gan của chiết xuất của chúng để giảm mỡ vi hạt và hoại tử tế bào gan trong tổn thương gan mãn tính, điều này phù hợp với nghiên cứu của chúng tôi. Dấu hiệu tổn thương gan như viêm, thâm nhiễm tế bào lympho, hoại tử và các hiệu ứng bóng phục hồi trở lại gần bình thường sau khi sử dụng liều cao chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và len men, được hỗ trợ bởi sự giảm ALT, AST, TG, cholesterol, NO, MDA và tăng hoạt động FRAP, SOD. Mối tương quan giữa các dấu ấn sinh học gan và những thay đổi mô bệnh học cho thấy rằng chúng có thể được sử dụng để phát hiện sớm tổn thương gan cấp tính. Giảm tổn thương sinh hóa và mô học được thực hiện bởi đậu xanh nảy mầm và lên men phù hợp với đặc tính bảo vệ gan của chúng. Không có nghiên cứu nào được thực hiện về sự thay đổi mô bệnh học của các chất chiết xuất từ đậu xanh nảy mầm và lên men trên gan giảm đọng lực với ethanol. Những thay đổi logic về mặt sinh hóa và mô bệnh học của gan suy giảm động lực sau khi được xử lí bằng đậu xanh len men và nảy mầm như mong đợi vì chúng chứa nhiều hợp chất hoạt tính sinh học hơn đậu xanh. Nhìn chung, đậu xanh lên men có tác dụng chống oxy hóa và bảo vệ gan tốt nhất. kết quả này cho ta thấy axit amin đóng vai trò quan trọng hơn GABA vì sự cải thiện mức độ axit amin trong đậu len men tốt hơn sao với đậu nảy mầm và ngược lại đối với hàm lượng GABA. V. Kết luận Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, không có nghiên cứu so sánh nào được thực hiện cụ thể giữa đậu xanh và các chất chiết xuất từ nước đậu xanh nảy mầm hoặc lên men về đặc tính enzym chống oxy hóa và bảo vệ gan của chúng . Chất chiết xuất từ nước đậu xanh đã lên men và nảy mầm đã được làm khô đông lạnh ở 1000 mg/kg thể trọng cho thấy tác dụng bảo vệ gan tiềm năng đối với tổn thương do ethanol gây ra dựa trên đánh giá sinh hóa huyết thanh và mô học của gan chuột. Phần lớn có thể là do hàm lượng axit amin và đặc tính chống oxy hóa mà các chất chiết xuất này sở hữu liên quan đến hoạt động nhặt rác FRAP và yếu tố liên quan đến oxy hóa, SOD. Kết luận, lên men và nảy mầm tăng giá trị dinh dưỡng và dược liệu của đậu xanh. Hơn nữa, kết quả có thể so sánh với silybin, một loại thuốc tiêu chuẩn thường được kê đơn để điều trị bệnh gan. Do đó, kết quả cho thấy khả năng sử dụng tiềm năng của chiết xuất nước đậu xanh lên men và nảy mầm từ sản phẩm tự nhiên ứng dụng trong tương lai để điều trị bệnh gan và mất cân bằng oxy hóa. **Các chữ viết tắt: ALT: Alanine transaminase AST: Aspartate aminotransferase GABA: axit y-amino butyric TG: Triglyceride NO: Nitric oxide ** Lời cảm ơn Dự án này được tài trợ bởi Quỹ Khoa học điện tử thuộc Bộ Nông nghiệp (MOA). Malaysia ** Tài liệu tham khảo: [1] MM Brzóska, J. Moniuszko-Jakoniuk, B. Piłat-Marcinkiewicz, và B. Sawicki, "Chức năng gan và thận và mô học ở chuột tiếp xúc với cadmium và etanol, " Rượu và Nghiện rượu, tập.38, mục 1, trang 2-10, 2003. [2] NE Rocha-Guzmán, A. Herzog, RF González-Laredo, F.J. Ibarra-Pérez, G. Zambrano-Galván, và JA Gallegos-Infante, “Hoạt động chống oxy hóa và chống tác dụng phụ của hợp chất phenol trong ba nhóm màu khác nhau của các giống đậu thông thường (Phaseolus vulgaris), “Hóa học thực phẩm, tập 103, mục 2, trang 521–527, 2007. [3] US Satyapal, VJ Kadam, và R. Ghosh, “Hoạt động bảo vệ gan của livobond một công thức polyherbal chống lại CCl4 gây độc gan ở chuột,” Tạp chí dược phẩm Quốc tế, tập 4, mục 6, trang 472–476, 2008. [4] VRLLópez, GSRazzeto, MSGiménez và N.L.Escudero, “Các đặc tính chống oxy hóa của hạt rau dền và ảnh hưởng của chúng đối với gan của chuột được xử lý bằng rượu, " Thực phẩm thực vật cho Dinh dưỡng con người , tập 66, mục 2, trang 157–162, 2011. [5] GJ Huang, JS Deng, SS Huang, YY Shao, CC Chen, và YH Kuo, “Tác dụng bảo vệ của antrosterol khỏi Antrodia camphorata nhấn chìm toàn bộ nước dùng chống lại Tổn thương gan cấp tính do carbon tetrachloride gây ra ở chuột,”Hóa học thực phẩm , tập. 132, mục 2, trang 709–716, 2012. [6] T. Liu, J. Zhao, L. Ma, Y. Ding và D. Su, “Tác dụng bảo vệ gan của tổng số triterpenoids và tổng số avonoid từ Vitis vinifera L chống lại tổn thương gan do miễn dịch ở chuột,” Thuốc bổ sung và thay thế dựa trên bằng chứng, tập.2012, Bài báo ID 969386, 8 trang, 2012. [7] HA El-Beshbishy, OM Tork, MF El-Bab và MA Autifi, “Tác dụng chống oxy hóa và chống độc tố của polyphenol trong trà xanh chống lại tổn thương gan do azathioprine gây ra ở chuột,” Sinh lý bệnh học, tập 18, mục 2, trang 125–135, 2011. [8] F. Lai, Q. Wen, L. Li, H. Wu, và X. Li, “Các hoạt động chống oxy hóa của polysaccharide hòa tan trong nước chiết xuất từ đậu xanh (Vigna radiata L.) thân tàu được điều trị hỗ trợ bằng sóng siêu âm,” Carbohydrate Polyme , vol. 81, no. 2, trang 323–329, 2010. [9] SJ Wu, JS Wang, CC Lin và CH Chang, "Đánh giá của hoạt động bảo vệ gan của các loại đậu,” Phytomedicine, tập 8, mục 3, trang 213-219,2001 [10] Z. Madar và AH Stark, “Các nguồn cây họ đậu mới như làm tác nhân chữa bệnh , ” Tạp chí Dinh dưỡng Anh , vol. 88, no. 3, pp.S287 – S292, năm 2002. [11] Y. Yao, F. Chen, M. Wang, J. Wang, và G. Ren, “Hoạt động chống bệnh tiểu đường của chất chiết xuất từ đậu xanh ở chuột KK-Ay bị tiểu đường,” Tạp chí Hóa học Nông nghiệp và Thực phẩm , vol. 56, no. 19, tr.8869–8873, 2008. [12] SJ Lee, JH Lee, HH Lee và cộng sự, “Tác dụng của đậu xanh chiết xuất etanol trên các cytokine gây viêm trong LPS stimu-Các đại thực bào có mỡ, ” Khoa học Thực phẩm và Công nghệ Sinh học, vol. 20, no.2, trang 519–524, 2011. [13] MJR Nout và JL Kiers, “Lên men nhiệt độ, đổi mới và chức năng: cập nhật vào thiên niên kỷ thứ ba, ” Tạp chí Vi sinh vật học ứng dụng , tập. 98, mục 4, trang 789–805, 2005. [14] R. Fernandez-Orozco, J. Frias, H. Zielinski, MK Piskula,H. Kozlowska và C. Vidal-Valverde, “Nghiên cứu động học của các hợp chất chống oxy hóa và khả năng chống oxy hóa trong quá trình mầm mination của Vigna radiata cv. ngọc lục bảo, cv tối đa Glycine. jutrovà Glycine max cv. công đức,” Hóa học thực phẩm , tập. 111, mục 3, trang 622–630, năm 2008. [15] YZ Ding, SY Zhang, P. Liu và cộng sự, “Những thay đổi vi sinh và sinh hóa trong quá trình chế biến món ăn truyền thống của Trung Quốc douzhi,, ” Kiểm soát thức phẩm, tập 20, mục 12, trang 1086–1091, 2009. [16] A. Matsuyama, K. Yoshimura, C. Shimizu, Y. Murano, H.Takeuchi và M. Ishimoto, “Đặc tính của glutamatedecarboxylase trung gian -amino butyric axit tăng trong giai đoạn nảy mầm sớm của đậu tương (Glycine max [L.] Merr), ”Tạp chí Khoa học sinh học và Kỹ thuật sinh học , số 107, mục 5, trang 538– 543, năm 2009. [17] CH Oh và SH Oh, “Tác dụng của gạo lứt nảy mầm chiết xuất với hàm lượng GABA tăng cường đối với sự tăng sinh và quá trình chiết của tế bào ung thư,” Tạp chí Thực phẩm Thuốc, số 7, mục 1, trang 19–23, 2004. [18] N. Watanabe, Y. Endo, K. Fujimoto và H. Aoki, “Đậu tương lên men giống Tempeh (GABA-tempeh) có hiệu quả trong chuyển hóa lipid ở chuột,” Tạp chí Khoa học Oleo , số 55, mục 8, trang 391–396, 2006. [19] YM Kang, ZJ Qian, BJ Lee và YM Kim, "Tác dụng bảo vệ của rong biển lên men làm giàu GABA chống lại độc tế bào do ethanolind gây ra trong tế bào HepG2,” Công nghệ sinh học và Kỹ thuật xử lý sinh học, tập 16, mục 5, trang 966–970, 2011. [20] SK Yeap, NM Ali, HM Yusof và cộng sự, “Chống tăng đường huyết tác dụng của chiết xuất đậu xanh lên men và không lên men trên chuột mắc bệnh tiểu đường do alloxan gây ra, ” Tạp chí Y sinh và Công nghệ sinh học, Bài báo ID 285430, 7 trang, 2012. [21] JS Tsai, YS Lin, BS Pan, và TJ Chen, “Các peptit chống tăng huyết áp và axit -aminobutyric từ prozyme 6 được tạo điều kiện vi khuẩn lactic lên men sữa đậu nành, ” Quy trình hóa sinh tập 41, mục 6, trang 1282–1288, 2006. [22] Y. Guo, H. Chen, Y. Song, và Z. Gu, “Ảnh hưởng của việc ngâm và xử lý sục khí trên sự tích tụ axit -aminobutyric trong đậu tương nảy mầm (Glycine max L.), ” Công nghệ và Nghiên cứu Thực phẩm Châu Âu, tập 232, mục 5, trang 787–795, 2011. [23] W. Liming, Z. Jinhui, X. Xiaofeng, L. Yi, và Z. Jing, “ Xác định nhanh 26 axit amin và thay đổi hàm lượng của chúng trong sữa ong chúa trong quá trình bảo quản sử dụng sắc ký lỏng lỏng siêu hiệu suất,” Tạp chí Phân tích và Thành phần Thực phẩm, tập 22, mục 3, trang 242–249, 2009. [24] S. Saravanan, BN Prakash, P. Pandikumar, RM Karunai, P.M. Gabriel, và S. Ignacimuthu, “Tiềm năng điều hòa miễn dịch của Enicostema axillare (Lam.) A. Raynal, 1 cây thuốc truyền thống,” Tạp chí Dược liệu học, số 140, mục 2, trang 239–246, 2012. [25] AYL Lim, I. Segarra, S. Chakravarthi, S. Akram và J.P. Judson, “Phân tích mô bệnh học và hóa sinh về sự tương tác giữa sunitinib và paracetamol ở chuột,” BMC Pharmacology, số 10, mục 14, 2010. [26] LE Ilouno, EN Shu, và GE Igbokwe, “1 kĩ thuật cải tiến để kiểm tra hoạt tính của superoxide dismutase tế bào hồng cầu, ” Clinica Chimica Acta , tập. 247, phần 1-2, trang 1–6, Năm 1996. [27] M. Suhail và M. Faizul-Suhail, “Tình trạng oxy hóa-chống oxy hóa trong máu mẹ và dây rốn của bệnh nhân huyết áp bình thường và huyết áp cao, ” Tạp chí Y học lâm sàng Trung Quốc, tập4, mục 5, trang 241–248, 2009. [28] K. Thaipong. U. Boonprakob, K. Crosby. L. Cisneros-Zevallos, và). Hawkins Byrne, "So sánh các xét nghiệm ABTS, DPPH, FRAP và ORAC để ước tính hoạt động chống oxy hóa từ chất chiết xuất từ trái ổi.” Tạp chí Thành phần và Phân tích Thực phẩm, tập 19, số 6-7. Trang 669-675, 2006. [29] RR He, B. Tsoi, F. Lan, N. Yao, XS Yao và H. Kurihara, “ Các đặc tính chống oxy hóa của lutein góp phần bảo vệ chống lại bệnh viêm màng bồ đào do lipopolysaccharide gây ra ở chuột,” Y học Trung Quốc, tập.6, mục 1, trang 38, 2011. [30] P. Pramyothin, C. Ngamtin, S. Poungshompoo, và C.Chaichantipyuth, “Hoạt động bảo vệ gan của Phyllanthusamarus Schum. et. chiết xuất ở chuột được xử lý bằng ethanol: trong nghiên cứu ống nghiệm và trong cơ thể sống,” Tạp chí Dược liệu học, số 114, mục 2, trang 169–173, 2007. [31] J. Du, D. He, LN Sun et al., “ chiết xuất tinh dầu Hoveniae bảo vệ chống lại tổn thương gan cấp tính do rượu gây ra ở chuột, ”Sinh học dược phẩm , tập. 48, mục 8, trang 953–958, 2010. [32] AI Ghoneim và OA Eldahshan, “Tác dụng chống apoptotic của lá me chống tổn thương gan chuột do ethanol gây ra, ” Tạp chí Dược học và Dược liệu học, tập 64, mục 3, trang 430–438, 2012. [33] HOẶC Koch, S. Fusco, SC Ranieri và cộng sự, “Vai trò của yếu tố quyết định tuổi thọ P66shcA trong tổn thương gan do ethanol gây ra,” Điều tra Phòng thí nghiệm, tập 88, mục 7, trang 750–760, 2008. [34] A. Kshirsagar, A. Purnima, D. Ingawale, N. Vyawahare, K.Ingale và A. Hadambar, “Hoạt động chống oxy hóa và bảo vệ gan của chiết xuất Ethanolic của calotropis gigantea chống lại Paracetamol gây tổn thương gan ở chuột,” Tạp chí Nghiên cứu tế bào và mô , số 9, mục 2, trang 1859–1864, 2009. [35] W. Zhao, JJ Li, SQ Yue, LY Zhang, và KF Dou,“Hoạt động chống oxy hóa và tác dụng bảo vệ gan của polysac-charide từ Bei Chaihu (Bupleurum chinense DC), ” Carbohy-drate Polyme, tập 89, mục 2, trang 448–452, 2012. [36] ZA Zakaria, MS Rofiee, MN Somchit và cộng sự, “Hoạt động bảo vệ gan của dầu dừa nguyên chất đã qua chế biến khô và lên men,” Thuốc thay thế và bổ sung dựa trên bằng chứng, tập 2011, ID bài viết 142739, 2011. [37] SL Wang, YC Liang và TW Liang, "Thanh lọc và đặc điểm của một -amylase bền kiềm mới từ Chry-seobacterium taeanense TKU001, và ứng dụng trong chất chống oxi hóa và prebiotic,” Qúa trình sinh hóa , tập 46, mục 3, trang 745–750, năm 2011. [38] DK Kim, SC Jeong, S. Gorinstein và SU Chon,“Tổng số polyphenol, các hoạt động chống oxy hóa và chống tăng sinh chiết xuất khác nhau trong hạt đậu xanh và mầm,” Thực phẩm thực phẩm cho Dinh dưỡng Con người, tập 67, mục 1, trang 71–75, 2012. [39] SJ Lee và KG Lee, “Tác dụng ức chế của chất chống oxy hóa dễ bay hơi được tìm thấy trong các loại đậu khác nhau trên sự hình thành malonaldehyde ở huyết tương ngựa,” Thực phẩm và Chất độc hóa học, tập 43, mục 4, trang 515– 520, 2005. [40] N. Amat, H. Upur và B. Blažeković, “Hoạt động của bảo vệ gan trong cơ thể sống của dịch chiết Artemisia absinthium L. trong nước chống lại các tổn thương gan gây ra về mặt hóa học và miễn dịch ở chuột " Tạp chí dược liệu học tập 8, mục 2, trang 197–204, 2007. [41] R. Randhir và K. Shetty, "Đậu xanh được chế biến bằng chuyển đổi sinh học ở trạng thái rắn cải thiện hàm lượng và chức năng phenolic liên quan đến quản lý bệnh tiểu đường và loét," Thực phẩm sáng tạo Khoa học và Công nghệ mới nổi , tập 8, mục 2, trang 197-204, 2007. [42] P. Z. [42] P. Sikiric, S. Seiwerth, Z. Grabarevic và cộng sự,“ Tác dụng bảo vệ gan của BPC 157, một peptide 15-aminoacid, trên các tổn thương gan do căng thẳng kiềm chế hoặc thắt ống mật và động mạch gan hoặc dùng CCL4. Một nghiên cứu so sánh với chất chủ vận dopamine và somatostatin,” Tạp chí khoa học đời sống, số 53, mục 18, trang 291 – 296, 1993. [43] N. Komatsuzaki, K. Tsukahara, H. Toyoshima, T. Suzuki,N. Shimizu và T. Kimura, “Tác dụng của việc ngâm và thể khíxử lý về hàm lượng GABA trong gạo lứt nảy mầm, ” Tạp chí của Kỹ thuật Thực phẩm , tập. 78, không. 2, trang 556–560, 2007. [44] K.B. Park và S.H. Oh, “Sản xuất sữa chua với hàm lượng axit aminobutyric nâng cao và các chất dinh dưỡng có giá trị bằng cách sử dụng vi khuẩn axit lactic và chiết xuất đậu nành nảy mầm,” Công nghệ nguyên liệu sinh học, tập 98, mục 8, trang 1675–1679, 2007. [45] HJ Chung, SH Jang, HY Cho và ST Lim, “Ảnh hưởng của quá trình ngâm ủ và xử lý kỵ khí lên hàm lượng GABA ( -aminobutyric acid) trong lúa mạch không có vỏ sáp nảy mầm,” Khoa học và Công nghệ Thực phẩm tập 42, mục 10, trang 1712–1716, 2009. [46] AA Khalil, “Cải thiện dinh dưỡng của giống đậu xanh Ai Cập bằng probiotic lactobacilli,” Tạp chí Công nghệ sinh học Châu Phi, tập 5, mục 2, trang 206–212, 2006. [47] JY Cha, JJ Jeong, HJ Yang, BJ Lee và YS Cho, “Ảnh hưởng ủa tảo bẹ lên men đối với rượu dehydrogenase và acetaldehyde dehydrogenase trong Saccharomyces cerevisiae ” Tạp chí Vi sinh vật và Công nghệ Sinh học, số 21, mục 8, trang 791–795, năm 2011. [48] T. Norikura, A. Kojima-Yuasa, D. Opare Kennedy, và I.Matsui-Yuasa,” Tác dụng bảo vệ của axit -aminobutyric (GABA) chống lại độc tính tế bào của etanol trong tế bào gan chuột bị cô lập liên quan đến việc điều chỉnh mức độ polyamine trong tế bào” Amino Axit, tập 32, mục3, trang 419–423, 2007. [49] YH Kuo, P. Rozan, F. Lambein, J. Frias, và C. Vidal-Valverde,“ Ảnh hưởng của các điều kiện nảy mầm khác nhau đến hàm lượng protein tự do và axit amin không protein của cây họ đậu thương mại,”Hóa học thực phẩm, tập 86, mục 4, trang 537–545, 2004.